替考拉宁的鉴别检查方法

鉴别

(1)取本品约10mg,加水1m1溶解后,加2%茚三酮的乙醇溶液2ml,置水浴中加热5分钟,溶液显紫蓝色。(2)取本品约30mg,加水1ml溶解后,沿管壁缓缓加人蒽酮试液(取蒽酮0.2g,溶于95%硫酸溶液100ml中,摇匀,即得)2ml,轻轻摇匀,溶液即变成绿色。(3)在替考拉宁组分项下记录的色谱图中,供试品溶液中应出现与标准品溶液中A2组各组分(TA2-1、TA2-2、TA2-TA2-4和TA2-5)峰保留时间一致的色谱峰(4)本品的红外光吸收图谱应与对照的图谱(光谱集1214图)一致。

检查

酸碱度取本品,加水制成每1ml中含50mg的溶液,依法测定(通则0631),pH值应为6.3~7.7溶液的澄清度与颜色取本品5份,分别加水制成每1ml中约含50mg的溶液,溶液应澄清无色;如显浑浊,与2号浊度标准液(通则0902第一法)比较,均不得更浓;如显色,与黄色或橙黄色5号标准比色液(通则0901第一法)比较,均不得更深。氯化钠取本品约0.5g,精密称定,精密加0.9%氯化钠溶液10m1,加水稀释至50ml,轻摇使溶解,照电位滴定法(通则0701),用硝酸银滴定液(0.1mo/L)滴定至终点;另精密量取0.9%氯化钠溶液10ml,同法做空白校正,按滴定液消耗体积的差值计算供试品中氯化钠的含量。每1m硝酸银滴定液(0.1mol/L)相当于5.844mg的NaCl。含氯化钠不得过5.0%。残留溶剂照残留溶剂测定法(通则0861第一法)测定供试品溶液取本品约0.2g,精密称定,置顶空瓶中,精密加水5ml使溶解,密封对照品溶液取丙酮适量,精密称定,用水溶解并定量稀释制成每1ml中约含0.4mg的溶液,精密量取5ml,置顶空瓶中,密封色谱条件以5%二苯基-95%聚二甲基硅氧烷(或极性相近)为固定液的毛细管柱为色谱柱;柱温为50℃;进样口温度为200℃;检测器温度为250℃;载气为氦气或氮气;顶空瓶平衡温度为85℃,平衡时间为30分钟。测定法取供试品溶液与对照品溶液,分别顶空进样,记录色谱图。限度按外标法以峰面积计算,丙酮的残留量不得过1.0%水分取本品,照水分测定法(通则0832第一法1)测定,含水分不得过10.0%。重金属取本品1.0g,于500~600℃炽灼至完全灰化,取残渣照重金属检查法(通则0821第二法)试验,含重金属不得过百万分之二十。替考拉宁组分照高效液相色谱法(通则0512)测定供试品溶液取本品,加水溶解并定量稀释制成每1ml中约含2mg的溶液。系统适用性溶液取替考拉宁标准品,加水溶解并定量稀释制成每1ml中约含2mg的溶液色谱条件用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以二水合磷酸二氢钠7.8g,加水约1650ml使溶解,加乙腈300ml,用氢氧化钠试液调节pH值至6.0,用水稀释至2000ml为流动相A,以二水合磷酸二氢钠7.8g,加水约550ml使溶解,加乙腈1400ml,用氢氧化钠试液调节pH值至6.0,用水稀释至2000ml为流动相B,按下表进行线性梯度洗脱;检测波长为254nm;进样体积20l时间(分钟)流动相A(%)流动相B(%)1001000系统适用性要求系统适用性溶液色谱图中,替考拉宁组分峰的保留时间约为24分钟,各组分的出峰顺序及相对保留时间见下表。A3-1峰的拖尾因子应不大于2.2,重复进样3次,以A2-2峰面积计算,相对标准偏差应不大于2.0%组分名称相对于A2-2的保留时间(RRT)A3组分≤0.42A2组分>0.42~≤1.250.91AAAAA其他成分 测定法精密量取供试品溶液,注入液相色谱仪,量取各组分的峰面积,按式(1)、式(2)与式(3)分别计算各组分的含量替考拉宁A2组分之和(%)=Sn/(S+0.83Sb+S)×100%(1)替考拉宁A3组分之和(%)083Sb/(S+0.83S+S)×100%(2)其他成分之和(%)=S(Sn+0.835b+S。)×100%(3)式中S为替考拉宁A2组分的峰面积总和;Sb为替考拉宁A3组分的峰面积总和;S。为其他成分的峰面积总和限度替考拉宁A2(TA2)组分之和不少于80.0%,替考拉宁A3(TA3)组分之和不得过15.0%,其他成分之和不得过5.0%细菌内毒素取本品,依法检查(通则1143),每1mg替考拉宁中含内毒素的量应小于0.30EU。(供注射用)