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基因活性同位素分析实验——人生长激素的放射免疫分析法

2019.3.26
实验材料

hGH表达质粒

试剂、试剂盒

洗涤液亲和素包被珠

仪器、耗材

试管γ计数仪

实验步骤

1.  取转染了hGH表达质粒的哺乳动物细胞的培养液100~500 μl。

2.  加100 μl 培养液或标准品至12 mm×75 mm 圆底试管中。加入100 μl 125I-标记的抗体溶液,混合。加入1颗亲和素包被珠,盖上试管盖或用Parafilm膜封口,室温下在一水平旋转器上以约170 r/min 摇动下温育90 min。

3.  加2 ml 冼涤液洗磁珠两次。完全吸干洗涤液。
 


图一、人生长激素表达载体
 

4.  将试管置于γ计数仪上计数1 min。

 

5.  用试剂盒中的hGH标准品测得的数据绘制标准曲线。用这个标准曲线来计算未知样品的hGH含量。


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