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多元数学统计方法分析传统草药,使用UPLC 超高...(一)

2020.7.20

多元数学统计方法分析传统草药,使用UPLC 超高效液相色/TOF-MS飞行时间质谱比较不同样品种类


Kate Yu, Jose Castro-Perez, 和 John Shockcor
沃特世公司,米尔福德,马萨诸塞州,美国

前言
传统草药 (THM)或传统中药 (TCM)样品的分析研究是非常具有挑战性的,直接原因是样品的重现性差。植物提取物的成分会因产地,采收季节以及提取方法的不同而发生显著变化。即使提取物是来自同一株植物的提取物或来自相同名称的两株植物,其成分也不尽相同。

此外,为了有效的对中药进行质量控制,非常有必要对中草药进行分析比较。中草药样品分析对于传统草药的生理作用机理的研究也是非常关键的。

我们开发了一套简便快速且易于通用的传统中草药分析流程的(图 1)。该分析流程利用了沃特世(Waters®) UPLC® 超高效液相色谱的技术优势,即高分辨,高灵敏度和快速分离,并结合了 SYNAPT™ HDMS™ 质谱系统的飞行时间质谱仪(TOF MS)精确质量数测定的功能。该工作流程能够应用于化合物鉴定或样品解析。

传统中草药中的化合物鉴定在我们已在另一篇应用纪要中讨论过。1 本文将演示如何利用该分析流程借助多元数学统计方法进行样品数据的解析。结果表明,样品的比较可以在几个小时内完成并获得完整的样品信息。这显著地缩短了传统草药样品的分析时间和节省了人力。
200952716898.jpg
图 1. 传统草药分析的工作流程。

实验方法
本实验的样品来自于两种人参提取物口服液。
样品 1 是人参精口服液 (产自中国,JV Trading Ltd. 公司销售,纽约,纽约州)。
样品 2 是青春宝口服液 (产自中国,Overseas Factor Corporation 公司销售,旧金山,加利福尼亚州)。
每个样品在进样前先过滤。

液相条件
液相系统: 沃特世 ACQUITY UPLC® 超高效液相色谱系统
色谱柱: ACQUITY UPLC 超高效液相色谱 HSS T3 色谱柱
2.1 x 100 mm, 1.7 μm, 65 °C
流速: 600 μL/min
流动相 A: 水+ 0.1% 甲酸
流动相 B: 甲醇

梯度 :

时间

组成

曲线

/

0 min

95% A

/

/

10 min

30% A

Curve 6

/

17 min

0% A

Curve 6

/

20 min

95% A

Curve 1


质谱条件
质谱系统: 沃特世 SYNAPT HDMS 质谱系统
离子化模式: 电喷雾
毛细管电压: 3000 V
锥孔电压: 35 V
除溶剂温度: 450 °C
除溶剂气体: 800 L/Hr
离子源温度: 120 °C
采集范围: 50 to 1500 m/z
碰撞气体: 氩气

数据处理
化合物筛选和分析: MarkerLynxTM
应用管理软件
多元数学统计分析: SIMPCA-P


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