关注公众号

关注公众号

手机扫码查看

手机查看

喜欢作者

打赏方式

微信支付微信支付
支付宝支付支付宝支付
×

蛋白纯化仪使用常见的一些问题解决办法

2021.8.30

蛋白纯化怎么提纯,蛋白是大分子,和各种分子大小不同的白蛋白,有使用一些更简单的方法,以在蛋白质和小分子材料,并且还分离的蛋白质混合物中分离出来。分离不同分子大小的蛋白质主要是透析,超滤,凝胶过滤,离心分离等的方法。透析和超滤通常用于蛋白质分离方法。待分离的透析混合物放置在由半透膜的透析袋,然后浸入在透析液分离。超滤是通过半透膜中使用的离心力或压力的水和其他小分子,并截留在所述半透膜的过程中的蛋白质。

  蛋白纯化仪纯化方式是什么:

  1、沉淀。

  2、电泳:带电蛋白质是高于或低于它的等电点,在电场中可被移动到负电极或电场的正电极。支撑有薄膜电泳,电泳等。

  3、透析:利用两个透析袋把大分子进行蛋白质与小分子有机化合物可以分开的方法。

  4、层析:离子交换色谱,利用蛋白质的自由性质,特定的PH下,蛋白质的电荷量和性质不同,可以用离子交换色谱分离。阴离子交换色谱,负功率小的蛋白质首先被洗脱。分子筛,也称为凝胶过滤。细小的蛋白质进入毛孔,并在里面停留很长时间。大的蛋白质不能进入毛孔并直接流出。

  5、蛋白纯化仪纯化方式是什么,超速离心:蛋白质纯化可用于确定分子量可以用作所述蛋白质。其形成不同密度不同的蛋白质是分离的。

  蛋白纯化仪的使用小技巧:

  基线走不平

  基线上飘?下飘?上下波动?

  解决办法:

  基线走不平通常是因为紫外流通池卡住小气泡,这时候使用仪器较大流速10%~20%的流速冲洗仪器几分钟到十几分钟,基线基本就乖乖听话了哦!

  压力过大

  有些实验所用层析柱子耐压比较小,为了保护柱子就需要我们减小系统压力。由于进样阀和紫外流通池都具有较大的压力,可以选择泵头上样,这时候管路可以不连接进样阀及其他非必需部件。

  换液进气泡

  在使用泵头上样过程中,更换缓冲液时如何确保管路外接口不进气泡?

  解决办法:把上样泵头入口放置低于废液出口水平面,学好物理还是有用滴!

  莫名其妙柱子就干了

  你是否遇到过实验进程很顺利,柱子却突然干掉,而检查各管路及接头却没有松动?那么很有可能是仪器使用时间稍长有杂质污染了泵后单向阀,导致A、B两泵之间液体可以互流。这个问题可以通过抽其中一个泵的抽液阀,观察另一个泵进样管路里的液体是否随之流动来确定。

  自己动手拆卸零件?太复杂!劳烦工程师修理换件?快也要半天或一天能解决好。那么如何不影响实验进程?答案很简单,实验前把A、B两泵同时充满水,后面换液时只要保证不用的那个泵也充满液体就可以了。做了这个小小的改变,柱子再也不莫名其妙的干了。




推荐
热点排行
一周推荐
关闭