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琼脂糖凝胶电泳仪凝胶的制备

2019.1.24

琼脂糖凝胶电泳仪是以琼脂糖凝胶作为载体的电泳,广泛用于核酸的研究,为DNA分子及其片段的分子量测定和DNA分子构象分析提供了重要手段。

琼脂糖凝胶是从琼脂中精制出来的白色胶状多糖,是由1,3连接的β-D吡喃半乳糖和1,4连接的3,6脱水β-D吡喃半乳糖交替而成的中性物质。琼脂糖由于氢键和其它力的作用使其相互盘绕成绳状琼脂糖束,而形成大网孔型凝胶。

琼脂是从海藻中提取出来的多糖体,主要由琼脂糖(约占80%)和琼脂胶组成。琼脂胶是一种含硫酸根和羧基的强酸性多糖,从琼脂胶中脱去硫酸酯基和丙酮酸酯基可获得琼脂糖。琼脂胶和琼脂糖的结构相似,但由于琼脂胶含硫酸根和羧基,凝胶能力差;琼脂糖中存在极微量的硫酸根和丙酮酸酯基取代电离基团,在电场作用下能产生较强的电渗;硫酸根可与某些蛋白质作用,从而影响电泳速度和分离效果。因此,在琼脂糖凝胶制备过程中需要把琼脂胶尽量除去。质量较好的琼脂糖凝胶的硫酸根含量较低,通常小于0.2%,电渗较小。


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