1. 在试管中加入染膜外抗原单抗或阴性对照，在每一试管中加入大约 1x106 个细胞。混匀后，避光孵育 15 min。
2. 再加入 100 ul 的试剂，避光孵育 15 min。
3. 用 3 ml PBS+0.1% NaN3+5%FBS 洗涤 1 次，1500 r/min 离心 5 min，去上清。
4. 加入 100 ul 和相应的膜内标记抗体或阴性对照。
5. 混匀后，在 2~8℃ 下孵育 20 min。3 ml PBS+0.1% NaN3+5% FBS 洗涤 1 次。
6. 1500 r/min 离心 5 min，去上清，用 0.5 ml PBS+0.1% NaN3+5%FBS 重新悬浮。
7. 上机分析。 展开 | 
