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液相色谱仪色谱柱固定相填料的特点

2019.12.23

液相色谱仪色谱柱固定相填料有硅胶、多孔聚合物和无机填料等。

一、硅胶特点:

大多数HPLC色谱柱使用硅胶微粒作载体。

1、机械强度高,使柱反压较低。

2、表面通过化学改性(修饰),可形成具有不同官能团的键合相。

3、更换溶剂时填料大小不会变化。

4、在高pH值时会溶解。

5、表面呈酸性。

6、纯度不高的酸性硅胶(A型硅胶)可分离中性和非电离的化合物。

7、高纯度弱酸性硅胶(B型硅胶)可分离对离子和可电离的化合物,尤其是碱性化合物分离较好。

二、多孔聚合物特点:

反相HPLC色谱柱的大多数聚合物微粒由苯乙烯和二乙烯基苯交联而成。

1pH = 113均可用。

2、疏水保留性很强。

3、大孔的多孔聚合物对蛋白质样品的分离非常有用。

4、强保留的品可用0.1M的氢氧化钠从柱中洗脱。

5、柱效低。

6、在不同的有机改性剂中溶胀程度不同。

三、无机填料特点:

无机填料有石墨碳、氧化铝和氧化锆等。

1、石墨碳:

1)保留强,用于分离在C18柱上保留较小的化合物。

2)不会被流动相溶解,可用于任何pH值,适用温度范围宽。

3)柱效低,极易碎裂。

2、氧化铝:

1)刚性强,可制成稳定的柱床。

2)未改性的氧化铝在正相条件下可分离弱极性化合物。

3)可在pH值高达12的流动相中使用。

4)不能用于羧酸样品的分离。

3、氧化锆:

1)聚合物涂层的多孔氧化锆微粒柱可用于所有已知的HPLC洗脱剂。

2pH范围为114

3)可用于温度100℃


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