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低速离心机在分离细胞的应用

2020.2.03

离心机是一种结构复杂的高速旋转机械,它是利用离心力,不同物质在离心场中沉淀速度的差异,对混合溶液进行快速分离的专门设备,是一种将装有样品溶液的离心管、瓶或袋通过离心机转子置于离心轴上,利用转头绕轴高速旋转所产生的强大离心力,使样品中不同性质颗粒相互分离的特殊装置。可以实现样品的分析、分离。

从转速看,台式离心机基本属于低速、高速离心机的范畴,因此,具有低速、高速离心机的特点。与落地式离心机相比,只不过只是尺寸和容量小一些。

离心机的式样和型号很多,有国产的和进口的,按用途可分为分析式离心机和制备式离心机;按转速可划分为:

普通离心机(低速)<10000r/min;

高速离心机10000 ~30000r/rain;

超速离心机30000 ~80000r/min;

超高速离心机>80000r/min;

特定细胞株的功能、行为和生化特性的分析在现有技术水平上只能通过相对纯的细胞株才能弄清,然而从组织、血液和其它体液标本中获得的细胞都是不同类型细胞的混合物,并且不同细胞或同一细胞株的不同周期与其它细胞相比,其代谢过程、生物特性和理化参数大多都有差异。

细胞分离技术包括离心技术、流式细胞术和细胞电泳。离心是研究如细胞核、线粒体、高尔基体、溶酶体和微体,以及各种大分子基本手段。流式细胞术是对单个细胞进行快速定量分析与分选的一门技术。细胞电泳是指在一定PH 值下细胞表面带有净的正或负电荷,能在外加电场的作用下发生泳动。

分离不同细胞株的方法概括起来可分为两大类:

一是:根据细胞的物理学特性差异分离,包括低速离心机分离法、物理吸附法、凝胶色谱法和细胞电泳法等;

二是:根据细胞的生物学特性差异分离,包括花环形成法和单层细胞免疫吸收法等。

在诸多分离方法中,低速离心机分离法根据细胞大小和密度进行分离,分离介质选择广泛,原理简单,对细胞损伤小,可适用于各种不同的研究目的,已成为生物学实验室最常规的分离工具。

细胞组分是指细胞内部的亚细胞结构,如细胞核、线粒体、溶酶体、高尔基复合体和微粒体等亚细胞结构。人们可以像把细胞从组织中分离出来进行研究一样,把细胞组分从细胞中分离纯化出来,以研究它们各自特有的化学组成、代谢特点、酶活性和具体功能。尽管在一个世纪前就有人试图分离细胞器,但直到20世纪40年代有了超速离心机和细胞匀浆技术后,才真正建立了细胞器的分离技术。用这一技术可以获得相对纯净的各种细胞器甚至大分子颗粒。使用超速离心机是这一技术的关键,因此该技术称为细胞结构成分的离心分离技术。

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