关注公众号

关注公众号

手机扫码查看

手机查看

喜欢作者

打赏方式

微信支付微信支付
支付宝支付支付宝支付
×

基因靶向的原理方法

2022.4.26

将外源DNA导入靶细胞后,利用基因重组,将外源DNA与靶细胞内染色体上同源DNA间进行重组,从而将外源DNA定点整合入靶细胞基因组上某一确定的位点。

对于不同的生物体,所使用的基因打靶的方法也不用。对于小鼠来说,大致的流程如下:

从小鼠胚胎上提取干细胞;

同时,构建靶载体,靶载体中含有与靶基因同源的DNA片段;

将靶载体转染到干细胞中;

将筛选后获得的含有靶载体的干细胞进行扩增;

将含有靶载体的干细胞注入小鼠胚胎;

胚胎发育为嵌合体小鼠(部分器官为该改造后的干细胞发育而成)后,通过选择性培育(将嵌合体小鼠与正常小鼠交配,在下一代中进行筛选),获得基因敲除小鼠(全部器官为该改造后的干细胞发育而成)。

修改后的方法还可用于其他哺乳动物,如牛、羊、猪等。

基因打靶技术还被用于一些植物,特别是小立碗藓的研究。


推荐
热点排行
一周推荐
关闭