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免疫学实验--梅毒螺旋体明胶凝集试验介绍

2022.2.09

  梅毒螺旋体明胶凝集试验介绍:

  梅毒螺旋体简明胶凝集试验是用超声裂解的梅毒螺旋体为抗原,致敏红色明胶颗粒与人血清或血浆中的梅毒螺旋体抗体结合,产生肉眼可见红色凝集反应。

  梅毒螺旋体明胶凝集试验正常值:

  反应呈阴性

  梅毒螺旋体明胶凝集试验临床意义:

  1.TPPA试验具有敏感性高、特异性强,是梅毒诊断较好的确证试验。

  2.TPPA试验阳性患者,由于记忆细胞抗体复制能力强,特异性试验敏感性高,即使经抗梅毒治疗也终生阳性,因此不能作为治疗效果观察的指标。但根据临床观察,早期梅毒患者血清如TPPA试验为弱阳性反应,随时间延长可能转阴。

  3.特异性试验对一期梅毒可比非特异性试验早一周出现。梅毒过程中最初出现的是IgM体,梅毒感染后第2周即可从血清测出,而IgG抗体则需在感染后第4周方可出现测出。

  4.梅毒确证试验,一般定性试验阳性,则可作梅毒诊断依据,必要时做定量试验。经有效治疗后特异抗体滴度也可不同程度下降,但转阴机会甚少。

  此类试验特异性强,很少出现假阳性。但据统计,也可以有1%生物学假阳性存在。

  异常结果:①一期梅毒。即硬下疳 ,潜伏期2-4周,外生殖器部位发生暗红色硬肿块 、浅溃疡 ,有软骨样硬度,周围淋巴结肿大。②二期梅毒。在一期梅毒 1-2 个月之后,全身皮肤、粘膜发生对称泛发皮疹、斑疹、丘疹、脓疱疹等。粘膜可发生粘膜斑、扁平湿疣,传染性强。③三期梅毒。发生在感染后2-3年乃至10年,皮肤为树胶样肿,还可涉及骨、关节、心、血管,表现为主动脉炎、主动脉瓣闭锁不全和主动脉瘤等,侵及神经为脊髓痨 ,全身麻痹 ( 麻痹性痴呆 )等等。

  需要检查的人群:有上述症状者

  梅毒螺旋体明胶凝集试验注意事项:

  1.TPHA、TPPA反应板要清洁干净,孔内无异物,以避免假阳性。要用U形板,不能用V形板。

  2.试剂盒不可置0℃以下以防止冻结,不同批号试剂间不可混合使用

  3.试验温度适宜15℃-25℃,天热时应将湿盒置空调室内。

  4.如未致敏细胞出现凝集反应,应做重吸收试验或改用其他确诊试验方法。

  不合宜人群: 没有

  检查前禁忌:注意正常的生活饮食习惯,注意个人卫生。禁止进行不洁性交。

  检查时要求:积极配合医生

  梅毒螺旋体明胶凝集试验检查过程:

  【材料】

  1.溶解溶液A:用于溶解致敏颗粒C和非致敏颗粒D。

  2.血清稀释液B:用于稀释血清标本。

  3.致敏颗粒C

  4.非致敏颗粒D

  5.对照用阳性血清E

  6.U型反应板

  【方法】

  (1)吸取B液100µl加入第8孔,B液25µl分别加入第1、2、3、4、5、6孔中;

  (2)血清稀释:吸取待检血清25µl放入第8孔,混匀后吸取25µl到第1孔,重复其稀释步骤至第6孔时,混匀后弃去25µl液体;

  (3)滴加致敏和未致敏颗粒:混匀细胞工作液,第2孔加25µl未致敏颗粒;第3、4、5、6孔加25µl致敏颗粒;颗粒加入完毕,将反应板置微量振荡器上振荡30s,置湿盒内,15℃-25℃孵育2h观察结果。

  【结果】

  阳性2+-4+:颗粒凝集覆盖整个孔底,多边形膜状,边缘粗糙。

  阳性1+: 颗粒凝集呈多边形性粗糙大环状。

  可疑±: 颗粒浓集呈边缘光滑小环状。

  阴性 -: 颗粒聚集在孔底中央、光亮、边缘光滑。

  定量试验以出现阳性反应(1+)的最高稀释度作为最终滴度。

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