胆碱酯酶的测定
实验方法原理
实验材料 胆碱酯酶
试剂、试剂盒 Tris-HCl氯化乙酰胆碱氯化镁NaOH
仪器、耗材 自动滴定器
实验步骤
空白对照:保持 pH 7.4,持续记录几分钟每次 0.01 mol/L 氢氧化钠的用量。
样品:加入酶溶液(例如 0.1~1 ml),保持 pH 7.4,并记录 5 min 每次 0.01 mol/L 氢氧化钠的用量。
计算 25℃ pH 7.4 时,每分钟一个单位水解的 1 umol 乙酰胆碱。
注意事项
其他
试剂:
0.02 mol/L Tris-HCl,pH7.4
2.2 mol/L 氯化乙酰胆碱(Mr=181.7;40 g 溶于 100 ml 水中,碘化丁酰胆碱,Mr=301.2)
0.2 mol/L 氯化镁(MgCl2·6H2O;Mr=203.3;4.1 g 溶于 100 ml 水中)
0.01 mol/L 氢氧化钠标准溶液作为滴定剂,加入自动滴定器的滴管中
胆喊酯酶,溶于 H2O 中,1 mg/ml
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