输血前血型血清学检查血标本采集试管的选择

【摘要】 目的  探讨不同采血试管采集血标本对前血型血清学试验结果的影响，选择最适合血型血清学试验的采血试管。 方法  随机抽取输血前患者50例，用EDTA K 2 干粉抗凝试管、1:9枸橼酸钠抗凝试管、肝素抗凝试管、促凝试管、无抗促凝干燥试管各采血2ml，均采用不同的试验方法做红细胞ABO及Rh（D）血型抗原鉴定、血清（血浆）ABO系统血型抗体及不规则抗体检测。 结果  所有血标本采用试管盐水介质凝集试验进行红细胞血型抗原鉴定时结果均清晰易判读;所有抗凝血标本做ABO特异性抗体检测时，不受纤维蛋白析出及激活补体溶血的干扰，而非抗凝血标本则易受干扰;枸橼酸钠抗凝血标本和肝素抗凝血标本对凝聚胺均有较强的中和作用，而EDTA K 2 抗凝血标本则无明显影响;采用5种血标本进行试管抗球蛋白试验及微柱凝胶抗球蛋白试验检测血清（血浆）中血型抗体，结果完全一致。 结论  不同的血型血清学试验方法对血标本的要求不一，而EDTA K 2 干粉抗凝血标本适用于输血前所有的血型血清学试验。 

　　【关键词】  采血试管;输血前检查;血型血清学
    
　　准确的血型血清学检查是安全输注制品的关键，而选择合适的血标本是保证试验结果准确的前提。近年来，血型血清学试验新技术迅速发展，多种商品化采血试管陆续应用于临床。因此，本文比较采用各种采血试管采集血标本进行血型血清学试验时对结果的影响，以探讨选用适合于不同血型血清学试验的采血试管，现报告如下。

　　1 材料与方法

    1.1 材料 EDTA K 2 干粉抗凝试管、1:9枸橼酸钠抗凝试管、肝素抗凝试管、促凝试管（均由广州阳普医疗用品有限公司生产），无抗促凝干燥试管、凝聚胺试剂盒（中山市生科试剂有限公司生产），单克隆抗A、抗B试剂、微柱凝胶血型卡及微柱凝胶抗球蛋白卡（长春博迅生物技术有限责任公司生产），单克隆抗D试剂及多特异性（抗IgG、抗C 3 d）单克隆抗球蛋白试剂（美国DBL公司生产），筛检红细胞及普红细胞（上海市血液生物医药有限公司生产），A、B型标准红细胞（由本院血型学制备）。
　　1.2 方法
    1.2.1 标本采集 受血者50例，年龄18～75岁，各采血10ml，立即分装于5支不同的试管中，每支2ml，分别为1:9枸橼酸钠抗凝试管、EDTA K 2 干粉抗凝试管、肝素抗凝试管、促凝试管、无抗促凝清洁干燥试管，共250份血标本，采血后及时检测。
    1.2.2 标本检测 前血型血清学检测的项目包括:（1）ABO正反定型及Rh（D）血型鉴定;（2）不规则抗体检测;（3）试验 ［1］ 。采用试管盐水介质凝集法做红细胞ABO、Rh（D）血型抗原的鉴定及血清（血浆）中ABO系统抗体的检测，采用手工凝聚胺法、试管抗球蛋白法及微柱凝胶抗球蛋白法进行血清（血浆）中不规则抗体的检测。

　　2 结果

    2.1 5种采血试管血标本的试管盐水介质凝集试验结果分析 试管盐水介质凝集试验结果表明:鉴定红细胞血型抗原时结果均清晰易判读;所有抗凝血标本分离时间短，在进行ABO特异性抗体检测时，不受纤维蛋白析出及激活补体溶血的干扰，结果数小时仍稳定，无需立即离心观察;而非抗凝血标本由于凝固不完全，试验过程中在被检血清中加入标准红细胞后纤维蛋白进一步析出，影响对结果的判断;由于非抗凝血标本中的补体易被激活，血清中加入试剂红细胞后易发生不同程度溶血，并因溶血程度的不同而使特异性凝集强度表现为强弱不一致，需立即离心判读结果以减轻溶血对结果的影响，详见表1。
    表1 5种采血试管血标本的试管盐水介质凝集试验分析结果比较
　　注: * 以放置30min后肉眼可见血清（血浆）颜色变红为判断溶血的标准 
　  2.2 5种采血试管血标本用于手工凝聚胺法、试管抗球蛋白法及微柱凝胶抗球蛋白法进行血清（血浆）中不规则抗体检测及交叉配血试验结果比较 枸橼酸钠抗凝血标本和肝素抗凝血标本对凝聚胺均有较强的中和作用，因此要达到与其它3种标本同等的促凝效果需2～3倍凝聚胺用量，EDTA K 2 抗凝血标本则对凝聚胺没有明显的中和作用;在试管抗球蛋白试验及微柱凝胶抗球蛋白试验中5种血标本结果均一致，未见明显不良影响。

　　3 讨论

    输血前准确的血型血清学检查是保证安全、有效输血的前提，而血标本直接关系到试验结果的准确性。近年来随着对临床输血疗效及不良反应认识的深入、血型血清学试验技术的进步、医用采血试管种类的日渐多样化，传统的采集入洁净干燥试管中的血标本由于不抗凝，不适于全自动配血系统（可进行血型鉴定及抗体检测）的流水线作业，无抗凝血标本已不再是新技术条件下最适宜的血型血清学试验用血标本，如何选择适宜于不同血型血清学试验的血标本十分重要，而又很少被重视，有学者就某些试验与标本因素的影响做过部分比较 ［2～5］ ，但如何选择适宜于多种血型血清学试验方法血标本的文献报道不多，各实验室之间也不统一。
    本文通过对50例需输血患者采用5种不同采血试管采血进行各种血型血清学试验，结果表明不同试验方法对血标本的要求不一。非抗凝血标本血清分离时间长，不适于紧急输血时的检测，如果标本凝固不完全，试验过程中纤维蛋白进一步析出，影响对结果的判断;由于非抗凝血标本中的补体易被激活，血清中加入试剂红细胞后易发生溶血，并因溶血程度的不同而使特异性凝集强度表现为强弱不一致，需立即离心判读结果以减轻溶血对结果的影响。液体枸橼酸钠及肝素抗凝血标本不仅对血标本有一定稀释作用，而且对凝聚胺有较强的中和作用，影响凝聚胺的促凝效果，因此不适宜进行凝聚胺试验。EDTA K 2 干粉抗凝试管则无稀释血标本及中和凝聚胺的作用，故适宜进行凝聚胺试验;EDTA K 2 还可灭活血浆中的补体，避免试验过程中强抗A、抗B与A、B抗原作用时，补体C 1 固定到红细胞上，影响红细胞的凝集并引起溶血，从而影响对试验结果的判读 ［6］ 。通过比较，只有EDTA K 2 干粉抗凝血标本适合于盐水凝集试验、凝聚胺试验、试管抗球蛋白试验及微柱凝胶抗球蛋白试验等常用血型血清学试验，而且血浆分离快，可缩短输血前检查所需时间，有利于急诊患者输血抢救及采用微柱凝胶技术进行自动化、大样本的试验操作 ［7］ 。
    当然，影响输血前检查的标本因素是多方面的，首先应确保血标本来自受血者本人，其次如短时间内大量输液、非同型输血可稀释血型抗体;接受肝素、抑肽酶治疗的受血者标本同样可影响凝聚胺的促凝作用 ［4］ ;机体的学状态是可变的，尤其是近期接受输血及妊娠的患者等。因此，笔者认为，除应注意选择适宜的采血试管外，还应注意诸如上述情况，并尽可能采集新鲜的受血者血标本，当出现任何可疑结果时应综合考虑。