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如何检测线粒体内的ROS

2022.9.15

活性氧检测试剂盒是利用荧光探针DCFH-DA进行活性氧检测的。DCFH-DA本身没有荧光,可以自由穿过细胞膜,进入细胞内后,可以被细胞内的酯酶水解生成DCFH。而DCFH不能通透细胞膜,从而使探针很容易被装载到细胞内。细胞内的活性氧可以氧化无荧光的DCFH生成有荧光的DCF。检测DCF的荧光就可以知道细胞内活性氧的水平。活性氧检测试剂盒。

荧光法检测线粒体产生和释放的反应性氧化物(ROS)[10]。羟基自由基的检测(二羟苄胺DHBAs和水杨酸盐Salicylate)[11] ROS was evaluated by the staining of 2’,7’- dichlorofluorescein diacetate(二氯荧光乙酰乙酸盐).ROS production was detected by nitroblue tetrazolium (NBT,硝基四氮唑蓝)assay。

目前,对于细胞线粒体产生的ROS 测定,所发展的方法有(荧光标记后)激光扫描共聚焦显微术(Takahashi et al.,2002)和荧光探剂DCFDA标记后的荧光分光光度法(Esposti ,2002)等,本实验以lucigenin 或luminol 为探剂,用化学发光技术,对从正常大鼠肝细胞及心肌细胞分离的线粒体的METC 电子漏进行了测定

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