三酰甘油脂肪酶，三酰甘油酰基水解酶。
三酰甘油 → 甘油 ＋ 长链脂肪酸
游离羧基的释放引起 pH 的降低，而这可以用来鉴定酶的活性。在实验期间，为了保持一个稳定的 pH，建议 pH 稳定计与自动滴管连接，或者用从合成的底物上释放一个具有荧光的残基，根据其荧光光度测定活度。
| 实验材料 | 酶样品 |
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| 试剂、试剂盒 | 氯化钠氯化钙牛血清蛋白牛磺胆酸钠橄榄油-阿拉伯树胶乳胶脂肪酶NaOH |
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| 仪器、耗材 | 自动滴定器 |
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| 实验步骤 | 实验混合物： 5 ml 橄榄油-阿拉伯树胶乳胶 5 ml H2O 2 m l 3.0 mol/L NaCl 1 ml 0.075 mol/L 氯化钙 2 ml 0.5％BSA（酵母脂肪酶）或 0.027 mol/L 牛磺胆酸钠（猪脂肪酶） 15 ml，调至 pH 8.0
空白对照：记录约 3 min 内，每次自动滴定器加入的滴定标准液的量。
样品：在实验混合物中加入合适量的稀释酶（根据活性），并记录约 5 min 内，每次自动滴定器加入的滴定标准液的量。
计算：
25℃、pH 8.0 时，从乳化的橄榄油中，每分钟一个单位释放出 1 umol 脂肪酸。 展开 |
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| 注意事项 |
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| 其他 |
试剂：
3.0 mol/L 氯化钠（NaCl，Mr＝58.4；17.5 g 溶于 100 ml 水中）
0.075 mol/L 氯化钙（CaCl2·6H2O；Mr＝219.1；1.62 g 溶于 100 ml 水中）
0.005 mol/L 氯化钙（稀释 0.075 mol/L 氯化钙溶液 15 倍）。
0.5％ 牛血清蛋白（BSA，酵母脂肪酶）
0.027 mol/L 牛磺胆酸钠（猪脂肪酶，Mr＝537.7；1.45 g 溶于 100 ml 水中）
橄榄油-阿拉伯树胶乳胶。溶解 16.5 g 阿拉伯树胶于 130 ml 水中，补充至 165 ml。加入 20 ml 橄榄油和 15 g 碎冰，低速搅拌直到乳浊液形成。用玻璃绒过滤。
脂肪酶（储存溶液：每毫升 5 mmol/L 氯化钙溶解 1 mg，实验中再稀释于 5 mmol/L 氯化钙中）
0.01 mol/L NaOH 标准溶液作为滴定剂，加入自动滴定器的滴管中。 展开 |
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