异构酶的测定实验_​葡萄糖异构酶微板测定

TES NaOHD-葡萄糖间苯二酚FeNH4（SO4）2·12H2O

微孔板读数仪

实验所需「试剂」具体见「其他」

测定步骤与木糖苷基本相同，唯一不同的是在 490 nm 处测定吸光值。

试剂：

0.2 mol/L TES/NaOH，pH 8.0［N-tris（羟甲基）-甲基-2-氨甲基酸，Mr＝229.3；9.2 g 溶于 100 ml 水中，用 1 mol/L NaOH 调节至 pH 8.0，用水加至 200 ml］

2.0 mol/L D-葡萄糖（Mr＝180.2；7.2 g 溶于 20 ml 水中）

0.03 mol/L CoCl₂（含六分子水，Mr＝237.9；71 mg 溶于 10 ml 水中）

溶液 A：0.05％ 间苯二酚（Mr＝110.1；50 mg 溶于 100 ml 乙醇）

溶液 B：FeNH₄（SO₄）₂·12H₂O（Mr＝482.2）216 mg 溶于 1 L 浓 HCl