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高效液相色谱分析样品的溶解度选择

2016.2.15

  通常进行高效液相色谱分析是优先考虑的是样品不必进行预处理,就可经溶样来进行分析,因此样品在有机溶剂和水溶液中的相对溶解性是样品最重要的性质。

   由于样品在有机溶剂中溶解度的大小,初步判断样品是非极性化合物还是极性化合物,进而推断用非极性溶解剂戊烷、己烷、庚烷等,还是极性溶解剂二氯甲烷、氯仿、乙酸乙酯、甲醇、乙腈等来溶解样品,并通过实验判断。

   若样品溶于非极性溶剂,表明样品为非极性化合物,通常可选用吸附色谱法或正相分配色谱法、正相键合色谱法进行分析。若样品溶于极性溶剂或相混溶的极性溶剂,表明样品为极性化合物,通常可选用反相分配色谱法或更为广泛应用的反相键合相色谱法进行分析。

   若样品溶于水相,可首先检查水溶液的pH值,若呈中性为非离子型组分,常可用反相(或正相)键合色谱法进行分析。若pH值呈弱酸性,可采用抑制样品电离的方法,在流动相中加入硫酸、磷酸调节pH=2~3,再用反相键合相色谱法进行分析。若pH值呈弱碱性,则可向流动相中加入阳离子型反离子,再用离子对色谱法进行分析。若pH呈强酸性或强碱性,则可用离子色谱法进行分析。对呈强离子型水溶性生物大分子的分析仍是高效液相色谱的特殊难题之一,近年随凝胶过滤色谱和高效亲和色谱的迅速发展,对解决像蛋白质、核酸等生物大分子的分析提供了有效的途径。

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