凝胶渗透色谱仪的样品配制与进样
凝胶渗透色谱仪的样品配制与进样:
一、样品配制:
由于凝胶色谱仪中的浓度检测通常用示差折光检测器,其灵敏度不太高,所以样品浓度不能太低。但色谱柱的负荷量是有限的,浓度太高易发生超载现象。一般情况下,进样浓度按分子量大小的不同在0.05%~0.5%(质量百分数)范围内配置,分子量越大,溶液浓度越低。
样品配制应该严格按要求进行。通常室温静置12h以上,然后轻轻混匀,不能用超声器或剧烈振荡来加速溶解。溶液进样前应先过滤,防止固体颗粒进入色谱柱,引起柱内堵塞,损坏色谱柱。
二、进样:
1、分子量范围和样品浓度:
(1)分子量低于5000时,样品浓度<1%。
(2)分子量为5000~25000时,样品浓度<0.5%。
(3)分子量为25000~200000时,样品浓度<0.25%。
(4)分子量为200000~2000000时,样品浓度<0.1%。
(5)分子量>2000000时,样品浓度<0.05%。
2、进样体积:
50~100μL。
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