检测有机氯类农药——气相色谱法检测法
有机氯类农药是一类高效广谱杀虫剂，广泛用于杀灭农业害虫，曾是各国杀虫剂中使用最广泛的一大类。由于其残留量高，毒性大，我国已对粮食、果蔬等食品制定了残留限量标准，而有关中药材中农药残留的限量标准还很少。本文对黄芪、甘草中有机氯农药的残留量做了分析研究，呼吁有关方面对农药污染中药材的问题引起重视，确保中药材的质量。
样品以丙酮提取，在氯化钠存在下，以二氯甲烷进行液液分配，提取液以浓硫酸净化，采用SE-54弹性石英毛细管柱，GC/ECD检测有机氯(六六六，DDT异构体及七氯，艾氏剂)农药的残留量，最低检测浓度为3.2×10-2～1.4ng/g，加样回收率在77.8%～102.5%，并对不同产地的药材进行了实际残留量测定。
1、仪器
美国Varian6000气相色谱仪(63Ni电子捕获检测器);Varian4270记录仪。
美国迪马公司SE-54弹性石英毛细管柱(30m×0.32mm×0.25μm)。
超声波清洗器(德国)T-310型;真空旋转浓缩器(日本)NE-1型;K-D浓缩器;其它必备的实验室装置和器皿。
2、试剂
农药标准品：六六六(BHC)异构体(α-BHC,β-BHC,γ-BHC,δ-BHC)纯度分别为99.0%、99.2%、99.0%、98.9%,七氯 (Heptachlor)纯度为99.1%,艾氏剂(Aldrin)纯度为99.0%,滴滴涕(DDT)异构体(pp′-DDE、pp′-DDD、op′ -DDT、pp′-DDT)纯度分别为98.0%、98.5%、98.0%、98.2%(由秦皇岛商检局提供)。
丙酮、二氯甲烷、氯化钠、无水硫酸钠及浓硫酸均为分析纯;正己烷(分析纯重蒸);双蒸水。
3、实验步骤
3.1提取与净化精密称取已粉碎过的样品粉末2g，于100mL具塞三角瓶中，加入丙酮40mL、水20mL，超声波提取60min，再加入氯化钠约 6g及二氯甲烷30mL，超声30min，静置使水相与有机相完全分层。将有机相移入装有一定量的无水硫酸钠的100mL具塞三角瓶中，脱水，取干燥过的有机相35mL置100mL旋转蒸发瓶中，40℃水浴减压浓缩至约0.5mL，将浓缩物移入10mL具塞试管中，以正己烷5mL分数次洗涤蒸发瓶，合并洗涤液于试管中。向试管中小心加入浓硫酸约1mL，振摇1min，离心(3000r/min)10min。将上清液移入K-D瓶中，以正己烷洗涤试管2次，合并洗涤液，将溶液浓缩至1.0mL，取1.0μL，进行GC分析。
3.2测定条件载气：高纯氮;柱前压：0.6kg/cm2;补充气流量：22mL/min;进样口温度：180℃;检测器温度：290℃;分流时间：从 0.10min开始至1.60min停止，共1.5min;分流比：15∶1;柱升温程序：初始140℃，10℃/min升至210℃，8℃/min升至 250℃，保持4min。纸速：0.5cm/min;衰减：8;外标法定量。
3.3标准曲线绘制
农药标准品贮备液 (均以正己烷为溶媒):α-BHC：80μg/mL,β-BHC:460μg/mL,γ-BHC:275μg/mL，δ-BHC:680μg/mL,七氯:280μg/mL，艾氏剂:378μg/mL,pp′-DDE:490μg/mL，pp′-DDD:121μg/mL，op′-DDT:330μg /mL，pp′-DDT:270μg/mL。
分别吸取一定量标准贮备液，用正己烷稀释至5.0mL，使混合农药标准品溶液中各标准品浓度为：α-BHC：8×10-2μg/mL，β-BHC：11.96μg/mL，γ-BHC：1.10μg/mL,δ-BHC：0.952μg/mL，七氯：1.40μg/mL，艾氏剂：2.27μg/mL，pp′-DDE:0.980μg/mL，pp′-DDD:2.42μg/mL，op′ -DDT：2.64μg/mL，pp′-DDT:0.270μg/mL。
分别吸取一定体积的上述混合标准品溶液于5.0mL容量瓶中，用正己烷进行一系列稀释，取1.0μL进样，得标准曲线,见表1。
4、结果与讨论
4.1提取、净化
在中药材以及其它植物样品有机氯残留分析中，常使用的毛细管柱多为非极性或弱极性的，长度为25～30m，中等口径0.25～0.32mm，本实验选用SE-54弹性石英毛细管柱，在上述实验条件下，对10种有机氯进行了较好的分离，分离时间在16min内。将农药标准品溶液稀释成不同浓度进行测定，以5倍的噪声作为方法的最低检出量，以2g样品取样计算出最低检出浓度。
本实验采用的提取方法，主要参考H.Steiwandter提出的在线(on- line)提取法。其主要原理是采用电解质的作用，根据盐析的原理，使农药从水相进入有机相。本实验以丙酮作为提取剂，在丙酮萃取液中加入固体氯化钠分离农药的同时，加入二氯甲烷进行液液分配，提取和分离在同一个三角瓶中进行。该方法的优点在于不需对样品进行多次的提取和过滤，液—液分配也不需转移到分液漏斗中进行。样品提取液中的水经无水硫酸钠干燥后，不会影响测定结果，同时可减少农药的损失。
有机氯农药的净化多采用磺化法。本实验采用的磺化法去掉了分液漏斗的操作，直接将浓硫酸加入提取浓缩液中，减少了实验操作步骤，提高了实验的安全性和准确性。样品提取液只需加浓硫酸磺化1次，即可达到净化的目的。
4.2加样回收实验在黄芪和甘草样品中，分别加入一定量的混合标准品溶液进行加样回收实验，样品按上述提取、净化、测定操作程序进行。
4.3实际样品测定准确称取不同产地的药材(粉末)。
