关注公众号

关注公众号

手机扫码查看

手机查看

喜欢作者

打赏方式

微信支付微信支付
支付宝支付支付宝支付
×

拿来吧你,拯救你的重组蛋白

2021.8.27

重组蛋白是应用了重组DNA或重组RNA技术而获得的蛋白质。用于生产重组蛋白的宿主细胞主要是细菌(大肠杆菌)、哺乳动物细胞、昆虫细胞和酵母。重组蛋白已被广泛应用于蛋白结构研究、免疫检测试剂、重组蛋白药物、诊断试剂开发、抗体药物靶点、CAR-T细胞治疗靶点、Fc受体、流感病毒蛋白和细胞因子等大多数热门研究领域。

那大家在进行重组蛋白表达时不知道会不会纠结这些问题:该选择什么表达系统?蛋白产量怎么才能有所提高?                      

接下来带你们了解一些常见的外源基因表达系统(包括原核、真核表达系统)以及一些提高蛋白产量的方法。


原核表达系统(主要包括大肠杆菌表达系统和枯草芽孢杆菌表达系统),真核表达系统(主要包括哺乳动物细胞表达系统,酵母表达系统,昆虫表达系统)。


酵母表达系统具有一定的蛋白质翻译后加工能力,有利于真核蛋白的表达,特有的 AOX 强效启动子使得外源基因表达量很高,而且酵母的培养、转化、高密度发酵等操作接近原核生物,非常适合大规模工业化生产,另外用甲醇代替 IPTG 作为诱导物,部分甲醇酵母以甲醇等工业产物代替葡萄糖作为碳源,生产成本非常低。


但是酵母在表达外源基因时会造成产物蛋白的不均一、降解、信号肽加工不完全、多聚体形成等问题。


杆状病毒做为外源基因表达的宿主,由于其可以对真核蛋白进行翻译后加工等过程而被广泛地用于真核基因的体外表达。

体外重组蛋白表达系统主要分为真核表达系统和原核表达系统。其中原核表达系统以大肠杆菌表达为主,也是目前应用最广泛最多的表达系统。真核表达系统分为:哺乳动物细胞表达,酵母表达系统和昆虫表达系统。


推荐
热点排行
一周推荐
关闭