普鲁卡因青霉素的含量测定方法

照高效液相色谱法(通则0512)测定。供试品溶液取本品约70mg,精密称定,置50ml量瓶中,加流动相约30ml,超声使溶解后,用流动相稀释至刻度,摇匀。对照品溶液取青霉素对照品与盐酸普鲁卡因对照品适量,精密称定,加流动相溶解并定量稀释制成每1ml中分别约含青霉素0.8mg与普鲁卡因0.54mg的溶液。系统适用性溶液取青霉素V对照品适量,加流动相溶解并稀释制成每1ml中含青霉素ⅴ2.4mg的溶液,将此溶液与对照品溶液以1:3体积比混合。色谱条件用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以缓冲液(取磷酸二氢钾14g和40%氢氧化四丁基铵溶液6.5g溶解于约700ml水中,用1mol/L氢氧化钾溶液调节pH值至7.0,用水稀释至1000ml,混匀)-水乙腈(52:23:25)(用1mol/L氢氧化钾溶液或10%稀磷酸溶液调节pH值至7.5±0.05)为流动相;检测波长为235nm;进样体积10l系统适用性要求系统适用性溶液色谱图中,青霉素峰与青霉素V峰间的分离度应大于2.0。测定法精密量取供试品溶液与对照品溶液,分别注入液相色谱仪,记录色谱图。按外标法以峰面积计算供试品中C13H2oN2O2和C16H18N2O4S的含量。每1ng的C16H18N2O4S相当于1780青霉素单位。