液相色谱仪固定相的基质
高效液相色谱仪固定相的基体包括陶瓷-无机基体和有机聚合物基体。
一、无机物基质:
无机基质主要为硅胶和氧化铝。
1、硅胶:
硅胶是ZUI在高效液相色谱仪填料中的通用基质。
(1)特点:
(1)高强度、高刚性、易于控制孔结构和比表面积,不易在溶剂中膨胀。
(2)具有良好的化学稳定性、热稳定性和比表面化学反应性。
(3)硅胶表面富含硅羟基,是硅胶表面化学键合和改性的基础。
硅胶表面与各种配位体通过成熟的硅烷化技术键合,制备反相、离子交换、疏水、亲水和分子排斥色谱的填料。
(4)碱性水溶性流动相不稳定。通常,推荐的硅胶基质填料的pH范围为2-8。
(2)主要性能参数:
(1)平均粒度及分布。
(2)平均孔径及分布:平均孔径与比表面积成反比。
(3)比表面积:在液固吸附色谱中,硅胶的比表面积越大,溶质K的值越高。
(4)碳含量和表面覆盖率:反相液相色谱仪中,碳含量越高,溶质K值越大。
(5)水含量和表面活性:在液固吸附色谱中,硅胶水含量越小,表面甲硅烷基醇基团活性越强,溶质的吸附容量越大。
(6)端基密封:碱性化合物的峰形状主要受反相液相色谱仪的影响。
(7)几何形状:无定形全多孔硅胶和球形全多孔硅胶。前者成本较低,存在涡流扩散和柱渗透性差的缺点,后者没有这种缺点。
(8)硅胶纯度:对称柱填料采用高纯度硅胶,柱效率高,使用寿命长,碱性样品无尾。
(3)应用:
它适用于大多数高效液相色谱仪分析,尤其适用于小分子量化合物的分析。
适用于极性和非极性溶剂。
2、氧化铝:
它具有与硅胶相同的物理性能,并且可以耐受大范围的pH。不同于硅胶,氧化铝的结合相在水性流动相中是不稳定的。目前已出现在稳定的氧化铝键合相的水相中,并表现出良好的pH稳定性。
二、有机聚合物基质:
主要有机聚合物基体为交联苯乙烯-二乙烯基苯和聚甲基丙烯酸.
1、交联苯乙烯-二乙烯苯:
由苯乙烯和二乙烯苯交联而成。
(1)高效液相色谱仪在常压下的适用压力限值低于无机填料。
(2)疏水性强。
(3)适用于任何流动相,在整个酸碱度范围内具有较高的化学稳定性。介质表面没有游离离子。该塔可用氢氧化钠碱清洗。
(4)刚性小,易压缩,溶剂和溶质易渗透到有机基体中,导致填料颗粒的膨胀,降低了传质速度,降低了塔效率。
2、聚甲基丙烯酸酯:
(1)高效液相色谱仪在常压下的适用压力限值低于无机填料。
(2)聚甲基丙烯酸甲酯的疏水性强于交联苯乙烯-二乙烯基苯,但通过适当的功能碱改性可使其变为亲水性。
(3)聚甲基丙烯酸甲酯的耐酸性不如交联苯乙烯-二乙烯基苯,但在ph=13的条件下能经受反复漂洗。
(4)刚性小,易压缩,溶剂和溶质易渗透到有机基体中,导致填料颗粒的膨胀,降低了传质速度,降低了塔效率。
3、应用:
(1)当流动相发生变化时,所有聚合物基体都会发生膨胀或收缩。高效液相色谱仪用高交联聚合物填料的膨胀和收缩应受到限制。溶剂和小分子很容易渗入聚合物基体,因为小分子在聚合物基体中的传质速率比无机基体慢,导致小分子在聚合物基体中的柱效低。对于大分子如蛋白质和合成聚合物,聚合物基质和无机基质的效率比。因此,聚合物基体在高分子物质分析中得到了广泛的应用。
(2)交联苯乙烯-二乙烯基苯基质疏水相互作用强,可作为反相高效液相色谱仪固定相,以有机溶剂为流动相凝胶色谱。盐流动相的凝胶色谱必须在其表面进行化学修饰。