高效液相色谱仪保留时间漂移的解决方法
高效液相色谱仪保留时间漂移的解决方法有两种情况不会重复保留时间：也就是说，停留时间漂移和停留时间波动。前者是指仅在一个方向上改变保留时间，后者是指保留时间的波动而没有固定的规律性。为了找出问题的原因，区分这两种情况通常很有帮助。例如，保留时间的漂移通常由色谱柱老化引起，而色谱柱老化不会导致保留时间的不规则波动。实际上，保留时间的漂移主要是由于色谱柱的老化，机理不同，如固定相的损失（如水解），色谱柱污染（由样品或流动相引起）。
一 色谱柱平衡
如果观察到保留时间漂移，首先要考虑柱是否与流动完全平衡，柱的平衡通常需要10×20柱体积流动相，但如果在流动相中加入少量添加剂（如离子对试剂），则需要很长时间才能平衡柱。
高效液相色谱仪的流动相的污染也可能是原因之一。溶解在流动相中的少量污染物可能在色谱柱上缓慢富集，导致保留时间漂移,注意水是受污染的流动相成分。
二 固定相稳定性
高效液相色谱仪的固定相的稳定性受到限制，所以在推荐的pH内高效液相色谱仪的固定相也被缓慢水解。双功能配体和三功能配体比单功能配体更稳定；长链键比短链键更稳定；烷基键比氰基键更稳定。
柱的频繁清洗也加速了柱固定相的水解，其他硅酮基质键也可以在水溶液中水解，如氨基键。
三 色谱柱污染
高效液相色谱仪的保留时间漂移的，另一个常见原因是柱污染，高效液相色谱柱是一种非常有效的吸附过滤器，它可以过滤和吸附任何由流动相携带的物质。高效液相仪的污染源可以是，流动相本身，移动相容器，连接管，泵，注射器和仪表垫片以及样品。污染源通常可以通过实验确定。
如果样品色谱柱中残留有强组分，则可能是保留时间漂移的潜在来源。这些根通常是样本的矩阵。如生化样品（如血清）、食品中的淀粉、环境水样中腐殖酸等的药物、蛋白质和脂类中的赋形剂等。通常，样品中的强保留组分具有高分子量，在这种情况下，保留时间漂移或背压。重新增加。采用固相萃取等制样方法可以消除样品基质的影响。
避免色谱柱污染的最简单方法是采取预防措施。相反，很难找到问题和设计有效的清洁步骤，以消除污染物。强溶剂通常在一定的色谱条件下使用，但并非所有污染物都能在流动相中溶解。例如，THF可以去除反相色谱柱中的许多污染物，但蛋白质不能溶解在THF中。二甲基亚砜通常用于从反相色谱柱中去除蛋白质。
使用高效液相色谱仪保护柱是一种非常有效的方法。反流柱不仅是一种必要的方法。
四 流动相组成
高效液相色谱仪移动相组成的缓慢变化也是保持时间漂移的共同原因。例如，流动相中的挥发性成分挥发和循环均匀。
五 疏水坍塌
当一个充满了小孔径和良好端基密封的反相柱使用水作为流动相时，有时分离会突然失去，并且分析物的保留率会降低或完全不保留。这就是所谓的疏水性塌陷。这种现象是由于流动相不穿透静止相的表面。补救办法是将含有大量有机成分的流动相穿透到固定相，再以高含水率平衡流动相。这种现象也可能发生在色谱柱的长期储存中。含有极性基团的反色谱柱。
