多种细胞快速检测的方法（二）

荧光染料增殖试验 CFSE检测法

CFSE是一种可穿透细胞膜的荧光染料，具有细胞膜通透性，能够自由进入细胞；当CFSE扩散穿过细胞膜，会与细胞内源酯酶产生水解反应而被激发，发出绿色荧光，这些带荧光的CFSE会进一步与细胞骨架蛋白结合，形成稳定的胞内荧光蛋白。每当细胞进行分裂增殖，胞内荧光蛋白会被平均分配到下一代细胞中，因此细胞荧光强度会随着增殖代数增加而不断地降低（下图6），可用流式细胞仪进一步侦测分析得出细胞分裂增殖的情况。CFSE的浓度，对于最终判断细胞增殖结果有直接性的影响！

∆ 图6

台盼蓝细胞计数 台盼蓝（Trypan Blue）计数法

台盼蓝（BI，货号：03-102-1B）是一种蓝色细胞活性染料，无法通过结构完整的细胞膜进入细胞内部；但细胞死后，丧失细胞膜稳定性，台盼蓝会进入细胞将细胞染成蓝色，因此在细胞实验中，被常规地搭配自动细胞计数仪或血球计数板，应用于区分辨活细胞和死细胞、及检测细胞膜的完整性（如下图7）。

∆ 图7 THE END

当然，随着科技的日新月异，会有越来越多更精确的实验方法等着大家去学习研究。
您实验室都在用什么方法测定细胞活性呢? 快在下面留言跟我们分享噢！

Reference

• 参考网站：http://tinyurl.com/yyhapr9x

• Riss, Terry L., et al. "Cell viability assays." Assay Guidance Manual [Internet]. Eli Lilly & Company
   and the National Center for Advancing Translational Sciences, 2016.