细胞凋亡检测实验——线粒体膜势能的检测
| 实验方法原理 | 线粒体在细胞凋亡的过程中起着枢纽作用，多种细胞凋亡刺激因子均可诱导不同的细胞发生凋亡，而线粒体跨膜电位的下降，被认为是细胞凋亡级联反应过程中最早发生的事件，它发生在细胞核凋亡特征（染色质浓缩、DNA 断裂）出现之前，一旦线粒体DYmt 崩溃，则细胞凋亡不可逆转。
线粒体跨膜电位的存在，使一些亲脂性阳离子荧光染料如Rhodamine 123、3,3-Dihexyloxacarbocyanine iodide[DiOC6 （ 3 ） ] 、Tetrechloro-tetraethylbenzimidazol carbocyanine iodide[JC-1] 、Tetramethyl rhodamine methyl ester（TMRM）等可结合到线粒体基质，其荧光的增强或减弱说明线粒体内膜电负性的增高或降低。
|
|---|---|
| 实验步骤 | 将正常培养的细胞和诱导凋亡的细胞加入使用终浓度为Rhodamine 123（1 mM）或终浓度为DiOC6（25 nM），JC-1（1 mM），TMRM（100 nM），37 °C 平衡30 min，流式细胞计检测细胞的荧光强度。
|
推荐
