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史无前例!Western成像技术最新突破,让低丰度蛋白无处可藏

2021.12.27

      2019年底,一项全新的Western blot成像技术—e-BLOT接触式成像,在中国的上海医谷创新面世。这项技术完美解决了传统Western blot 成像仪器的灵敏度不够、定量范围窄、成像时间太长以及占地面积太大的问题;相对于冷CCD成像技术,e-BLOT接触式成像将成像灵敏度提升了2个数量级, 定量范围提升2个数量级, >95%的样品成像时间缩短到1秒以内,且仪器的体积缩小到传统仪器的1/10不到。该技术一面世就受到科研人员的高度认可,已帮助北京大学、上海交通大学、中科院、中国CDC等众多国家级学术研究单位解决了他们研究中遇到的Western blot成像难题。

       欲了解此技术的详情,我们还需要从Western blot的历史和Western blot成像方法的历史讲起。

       1981 年美国斯坦福大学的乔治·斯塔克(George Stark)发明了蛋白质印迹(Western blot),至今已有40年的时间。Western blot作为一个经典的蛋白定量技术,被越来越多的人所使用,已成为每个分子生物学实验室所必须要做的一个实验。但是Western blot 技术本身的发展却非常缓慢,尤其在成像检测技术方面已有20多年的时间没有新的突破。

Western blot常用的几种成像方法及优劣势如下:

图片.png

       在各种成像方法中,冷CCD化学发光成像由于具有操作简单、灵敏度高、定量范围宽等优势,成为了最受欢迎的成像方法,被超过99%的科研人员所使用。

       但是,随着科研的不断深入,科研人员反映Western blot也越来越难做,科学家在Western bot方面面临的难题具体表现在:

1,高丰度表达的蛋白都被做完了,剩下的尽是低丰度表达的蛋白,需要更加灵敏的成像技术。

2,容易获取的样品都被做完了,剩下的尽是不容易获取的样品,一份样品要做多个实验,也是需要更加灵敏的成像技术,且要求实验尽量要一次能做成,没有样品用来做大量的条件优化。

3,蛋白表达差异不大的都被做掉了,剩下的尽是些蛋白表达差异非常大,需要能准确定量的成像技术。

       虽然冷CCD化学发光成像方法有多种优势,被绝大多数人使用,但是由于其本身的技术限制,在面临超低丰度蛋白、稀有样品和表达差异巨大的样品时就显得无能为力了,这些随着科研逐步深入所带来的难题急需新的技术出现来解决。

这些技术限制包括:

1,冷CCD成像仪器所用的芯片本身太小,大多只有1英寸或者更小,信号获取的能力远远不够,导致微弱信号不能被采集到。

2,冷CCD成像仪器成像芯片本身的单个像素尺寸太小,边长一般在3-6um之间,像素太小导致芯片本身储存信号的能力太小,导致信号极易过度曝光,无法准确定量。

3,冷CCD成像Western blot 膜离CCD距离太远,导致绝大部分的光信号传输过程中直接损失掉了,并未到达CCD感光芯片,进一步降低信号采集的能力。

4,冷CCD成像需要前面加一个镜头才能实现成像,镜头内部都有一系列的透镜组,这些透镜组也会将本就非常微弱的化学发光信号阻挡掉一大半。

5,冷CCD成像所需成像时间太长,CCD本身的噪音随着时间的延长会随之积累,弱信号会被这些噪音所掩盖掉以至于不能成像。

       技术的瓶颈限制了冷CCD成像技术的发展,也间接影响科研的发展。工欲善其事必先利其器,必须要有更先进的技术才能突破现有方法的瓶颈,进而更好的为科研服务。

科学进步的历史进程中,仪器公司扮演了极其重要的角色,科学家开发出新的技术,仪器公司利用这些技术开发出新的工具来服务更多的科学家,循环往复,持续进步。

<em>上海</em><em>易</em><em>孛</em><em>特</em>光电技术<em>有限公司</em>

       Western成像领域同样是这样,易孛特生命科学(上海)有限公司拥有优秀的科学家团队和创新经验丰富的仪器团队,最前沿的技术和创新的思想碰撞出了一个Western成像领域的革命性突破—e-BLOT接触式成像技术。这项革命性创新的技术克服了现有技术在成像灵敏度、定量范围、成像速度和仪器体积大等诸多瓶颈,实现了Western成像技术新的飞跃,帮助科学家在新的科形势下的研竞争中取得先机。

       e-BLOT接触式成像技术主要突破点如下:

1,Western膜直接贴在感光芯片上进行成像,所有信号均被采集,没有任何光损失,极大的提高了成像的灵敏度。

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2,成像芯片的面积是现有成像技术芯片面积的131倍,超大的感光芯片具有超高的信号采集能力,让极其微弱的信号都无处可藏。


上海易孛特光电技术有限公司
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