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新型探针有望使显微拉曼应用于蛋白组学

2017.4.21

  一种新的方法增加了可以在生物样品中同时成像的分子数量。哥伦比亚大学的Wei Min及其同事表明,他们可以用这种方法同时解决24个染料标记分子。二十个使用的是新版的激发拉曼散射(SRS)显微,其被称之为电子前置谐振SRS;四个用的是荧光显微。

  新的拉曼探针可以对生物样品进行多色成像,如HeLa细胞

  SRS显微镜的原始版本是一种无标记的方法,这种方法需要研究人员用远离目标分子吸收波长的激光波长激发目标分子。该方法的缺点是不能在亚微摩尔浓度下检测分子。

  在新方法中,哥伦比亚大学的团队将光吸收拉曼活性标签附着在靶分子上。研究人员用吸收频率以下的激光束激发每个标记分子。这些变化提高了该方法对纳摩尔水平的敏感性,并且能够同时成像多个生物分子。

  新的探针包含与拉曼活性腈或炔共轭的呫吨支架。每个探针在1800-2800cm−1都有一个尖锐的拉曼散射峰。通过支架修饰和同位素编辑,研究人员可以调整拉曼峰的振动频率。他们报道了14种新染料,并表明它们可以与市售的六种拉曼标记和四种荧光染料一起使用。因为拉曼标记和荧光染料在不同的光谱区域吸收,所以它们不会彼此干扰。

  Min和同事使用16种这样的标记物来标记和成像活细胞和组织中的各种分子。他们想使用全面的探针调色板对复杂的混合物进行研究,如蛋白质组学。

  圣母大学光谱学专家扎克里·舒尔茨(Zachary D. Schultz)说:“这是一种类似于制作[表面增强拉曼光谱法]标记的方法;然而这种方法不需要纳米颗粒,可能会降低生物的副作用。应该能够使新的研究跟踪生物系统中物种数量增加。”


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