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阳性杂交瘤细胞的克隆化培养与冻存

2021.3.24

单个细胞培养又称克隆化。细胞克隆化一般至少进行3~5次。克隆化有以下几种方法:

(一)显微操作法

 直观可靠,但操作时间过长,容易增加污染机会。

(二)有限稀释法 

操作简单,出现率高,为实验室最常用的方法。

(三)荧光激活细胞分选仪

 先进、高效、高纯度、昂贵。

(四)软琼脂平板法 

本法缺点是琼脂融化温度较难掌握,过高会导致细胞死亡,过低使细胞分布不均匀,操作较复杂,克隆出现率不稳定。

杂交瘤细胞应及时冻存,以保证细胞不会因污染或过多传代变异丢失染色体而丧失功能。目前均采用液氮保存细胞。(注意逐步降温、快速复温)


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