PCR实验的特异性主要取决于什么
最关键的是退火温度,退火温度越高特异性越高。
其次还有Mg离子浓度,Mg浓度越高特异性越高。
引物浓度,特异性随着引物浓度的升高而降低。
做PCR我觉得引物设计是关键,其次模板质量也挺关键的。其次的话,摸索几次退火温度,用La taq扩不出来的话您就别自己折腾了,赶紧换引物吧。如果特异性不高切胶回收,再次来扩的话效果会好很多。
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最关键的是退火温度,退火温度越高特异性越高。
其次还有Mg离子浓度,Mg浓度越高特异性越高。
引物浓度,特异性随着引物浓度的升高而降低。
做PCR我觉得引物设计是关键,其次模板质量也挺关键的。其次的话,摸索几次退火温度,用La taq扩不出来的话您就别自己折腾了,赶紧换引物吧。如果特异性不高切胶回收,再次来扩的话效果会好很多。