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简述施万细胞的培养方法

2022.10.18

  (一)植块法:

  植块法原理是成纤维细胞的增殖速度要比施万细胞快,通过反复的贴壁便可以获得较高纯度的施万细胞。此方法培养的周期较长,且培养过程中伴随着细胞活性及分裂能力的下降。

  (二)酶消化法:

  酶消化法的主要原理是用酶去除组织中的间质,使组织更为分散而使细胞呈单层排列。采用组织块反复种植纯化法、低浓度胰酶快速消化和差速贴壁法对施万细胞进行纯化,结果施万细胞活性较高,纯度可达90%以上,细胞所受到的外界因素影响也较少。

  (三)三维培养法:

  植块法、酶消化法主要是基于二维培养方法,然而体外细胞培养的一个重要原则是需模拟体内细胞生长环境,该模拟系统中最重要的核心因素是细胞与培养环境之间的相互作用。不同于传统的二维化单层细胞培养,三维细胞培养技术是将具有三维结构不同材料的载体与各种不同种类的细胞在体外共同培养,使细胞能够在载体的三维立体空间结构中迁移、生长,构成三维的细胞载体复合物。三维细胞培养是将细胞培植在一定的细胞外基质中,细胞外基质蛋白充当生长支架,使得细胞能够分化产生一定的三维组织特异性结构,所创建的细胞生长环境则最大程度地模拟体内环境。在施万细胞的培养中也有学者采用该方法进行培养,在培养液中放入三维支架,使细胞贴壁,形成Bungner带,支架的主要材料是胶原,其次还有聚酯纤维、聚乳酸等。有研究者采用三维自组装多肽水凝胶作为基质三维培养人胎儿施万细胞,结果培养出的施万细胞活性较高,细胞形态更加典型,且0.25%水凝胶效果最佳,能够形成良好的形成纳米纤维支架结构。

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