高效液相色谱-动物性食品药物残留检测方法
方法一，以固相萃取和柱前衍生等技术为基础，建立同时检测猪鸡可食性组织和牛奶中7种青霉素多残留的高效液相色谱分析法。肌肉组织中7种青霉素类抗生素直接采用磷酸缓冲液提取然后SPE净化，猪鸡肝脏、猪肾脏样品中7种青霉素类抗生素先用乙腈，并将乙腈层用45-50℃高纯氮气吹干，组织残渣再用磷酸缓冲液提取与乙腈吹干物混合供SPE净化，牛奶样品中7种青霉素类抗生素直接用溴化四丁基铵溶液提取旋转蒸干，再用磷酸缓冲液溶解供SPE净化。采用SPE固相萃取柱净化，乙腈洗脱，洗脱液45-50℃高纯氮气吹干，标准稀释液定容，1，2，4-三唑汞(Ⅱ)溶液衍生，反相高效液相色谱分离，紫外(325nm)检测。阿莫西林、青霉素G、氨苄青霉素、青霉素V标准溶液的最低定量限为10μg/kg，苯唑青霉素、乙氧萘青霉素、双氯青霉素的最低定量限为30μg/kg。牛奶样品经过浓缩，阿莫西林、青霉素G、氨苄青霉素、青霉素V的最低检测限和最低定量限为2μg/kg，苯唑青霉素、乙氧萘青霉素、双氯青霉素为15μg/kg。在组织样品中阿莫西林、青霉素G、氨苄青霉素、青霉素V的最低检测限和最低定量限为25μg/kg，苯唑青霉素、乙氧萘青霉素、双氯青霉素的最低检测限和最低定量限为75μg/kg。在2～300μg/kg添加浓度范围内，7种药物的回收率在64.4％～88.0％之间，变异系数CV≤19.4％。
方法二，以液-液提取和固相萃取为基础，建立猪肌肉、猪肝脏、猪肾脏、鸡肌肉、鸡肝脏、鸡蛋、鱼肌肉和牛奶中盐酸土霉素、盐酸四环素、盐酸金霉素和强力霉素多残留高效液相色谱分析方法。样品中残留药物经Mcllvaine缓冲液提取、固相萃取净化，甲醇草酸溶液洗脱，洗脱液45-50℃高纯氮气吹干，流动相定容，反相高效液相色谱分离紫外(350nm)测定。四种药物标准溶液的最低定量限均为25μg/kg。在猪鸡鱼肌肉、猪鸡肝脏、猪肾脏、鸡蛋和牛奶样品中最低检测限和最低定量限为50μg/cg。在添加浓度为50、100、200μg/kg时，4种药物的回收率在70.4％～89.9％之间，变异系数CV≤16.0％。
方法三,以固相萃取和柱后衍生等技术为基础，建立了庆大霉素、安普霉素、卡那霉素和新霉素在猪肉和牛奶中多残留高效液相色谱检测法。猪肉中残留的氨基苷类药物用水提取三氯乙酸沉淀蛋白，固相萃取净化；牛奶样品采用磷酸缓冲液提取，三氯乙酸沉淀蛋白，固相萃取净化，甲醇洗脱N2吹干。反相高效液相色谱法分离柱后衍生荧光检测。庆大霉素、安普霉素、卡那霉素标准溶液的最低定量限均为312μg/kg，新霉素标准溶液的最低定量限为625μg/kg。在猪肌肉和牛奶样品经过浓缩等处理，庆大霉素、安普霉素、卡那霉素标准溶液的最低定量限均为100μg/kg，新霉素标准溶液的最低定量限为200μg/kg。在100～800μg/kg添加浓度范围内，4种药物的回收率在71.1％～85.4％之间，变异系数CV≤18.9％。氨基苷类的最低检测限和最低定量限为100μg/kg。 三种方法的灵敏度，准确度和精密度均符合残留检测方法要求，也是我国首次建立这三类药物的多残留检测方法。三种方法的建立将为我国兽药管理部门、食品卫生检疫部门、进出口贸易等部门监控这三类药物多残留提供有力的技术力量，也为我国兽药多残留分析方法的建立奠定基础。
