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NRAMP-1 elisa检测试剂盒免疫检测方法

2020.1.31

NRAMP-1 elisa检测试剂盒免疫检测方法:

(一)夹心法:

可分为双抗体夹心法和双抗原夹心法。

双抗体夹心法将特异性抗体与固相载体连接,形成固相抗体;加入待测样本,形成固相抗体-抗原复合物,洗涤后加入标记特异性抗体并孵育,形成固相抗体-抗原-标记抗体复合物,洗涤除去未结合的标记抗体;加入不同的反应物质(如酶促底物、碱性溶液、氧化剂等),得到反应信号。

双抗原夹心法与双抗体夹心法类似,将特异性抗体与固相载体连接,形成固相抗原;加入待测样本,孵育使样本中的抗原与固相抗体充分反应,形成固相抗原-抗体复合物,洗涤除去未结合物质;加入标记特异性抗原并孵育,加入反应物质,判读结果。

(二)间接法:

间接法仅能检测抗体,基本原理是将特异性抗原包被在固相载体上,加入待测样本,形成固相抗原-受测抗体复合物;孵育洗涤后,加入标记抗体。

(三)竞争法:

既检测抗体,也可检测抗原。

基本原理是先将抗小分子抗原的特异性抗体包被在固相载体上,然后同时加入待测样本与标记小分子,待测样本中的小分子与标记小分子竞争与固相抗体相结合,温浴一定时间后洗涤加入不同的反应物质,得到反应信号。

(四)捕获法:

NRAMP-1 elisa检测试剂盒可测定血清中某种特定的免疫球蛋白,目前主要用于IgM抗体的检测。通常包被的固相抗体为针对IgM分子μ链的抗体,加入待测样本后,特异及非特异的IgM抗体都会被固相抗体捕获,之后加入能够与特异性抗体结合的已知抗原,再加入能够与已知抗原相结合的标记抗体。


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