血清或培养基产生了颜色或沉淀的问题

2020年4月13日 21:10:11 来源: 互联网
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1、问:我用的是Gibco胎牛血清澳洲,56℃30分钟灭活后出现了白色少量絮状沉淀,是不是污染?还能不能再用?血清的生产日期是2006年7月(现在是2007年6月11日)。

答:应该问题不大。你可以取少量血清放入培养皿中,37℃过夜培养看看就知道是否污染了。血清中沉淀物的出现有许多种原因,但最普遍的原因是由于血清中脂蛋白的变性所造成,而血纤维蛋白(形成凝血的蛋白之一)在血渭解冻后,也会存在于血清中,亦是造成沉淀物的主要原因之一。但这些絮状沉淀物,并不影响血清本身的质量。若您欲去除这些絮状沉淀物,可以将血清分装至无菌离心管内,以400g稍微离心,上清液即可接着加入培养基内一起过滤。

2、问:我用MTT法测细胞的增殖,用DMSO裂解细胞,发现把DMSO加入到孔中就会形成乳白色(用的含胎牛血清的1640培养基,由于没有离板子的离心机,所以没有去除培养基直接加的DMSO)。以前用含小牛血清的培养基没有看到有这种情况。该怎么解决?

答:为什么要用离心机离心呢?难倒你养的是悬浮细胞吗?如果是贴壁细胞的话直接将MTT倒掉,再加DMSO即可,我们就是这么做的,效果很好!并且测细胞的增殖的话如果不去掉MTT就加DMSO的话误差应该很大!有时不一定就是血清的原因,可能跟你的MTT放置的时间或以及其他成分有关!

3、问:(1)GIBCO胎牛血清500ml,今天解冻后没有混匀直接分装,结果使得前面的几管是清亮的,后面就带有棕色的,不知有没有影响?估计有什么影响?前面的成分好还是棕色的成分好啊?

答:肯定有。最好还是重新混合重新分装,我觉得有效成分会集中在棕颜色部分。

问:(2)为什么会出现棕色呢?

答:血清中的棕色多一些可能是因为红蛋白的含量高些的缘故吧。

问:(3)血清灭活之后可以存放吗?我的是前天灭活的,但是没有加到培养基里,而是放在冰箱里,那下次可以直接用吗?还是再次灭活啊?

答:当然可以,如果多的话,分装后最好放在-20℃,下次用时再解冻,也不用再灭活。最好用一管拿一管,少许血清可以放在4℃。分装时还要注意不要装得太满,以免溢出污染。

 


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