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精准医学时代激素检测大跨步发展

2019.8.19

　　在临床检测中，激素检测在内分泌疾病诊疗中扮演着重要角色，尤其是临床医生在尝试更精准地诊断疾病时，除了影像学检查，实验室检查显得尤为重要。

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　　激素（Hormone），希腊文原意为“奋起活动”，它对机体的代谢、生长、发育、繁殖、性别、性欲和性活动等起重要的调节作用。由于激素是高度分化的内分泌细胞合成并直接分泌入血的化学信息物质，它可以通过调节各种组织细胞的代谢活动来影响人体的生理活动。在激素的检测历史上，放射免疫测定法(radioimmunoassays， RIAs)的使用使得人们可以在不同生理条件下测定激素水平。然而，随着检测技术的发展以及对人们内分泌疾病认识的深入，免疫学方法在激素检测上的缺点也凸现出来，例如存在嗜异性或自身抗体干扰；对激素代谢的结构类似物不能区别检测，存在交叉反应；动态线性范围较窄，不能满足浓度跨度范围较大的激素检测需求；对含量相对较低的激素检测的灵敏度不够；不能同时检测多种激素等。

　　随着质谱检测技术不断完善，检测精度逐渐提升，已经有越来越多的实验室开始使用质谱技术检测激素类物质。回顾过去30年，质谱检测技术在内分泌疾病领域的应用促进了几项临床革新，例如有效提升了先天性肾上腺皮质增生症(congenital adrenal hyperplasia，CAH)新生儿筛查的诊断敏感性；提升了性激素低浓度值检测的准确性；革新了嗜铬细胞瘤/副神经节瘤(pheochromocytoma and paraganglioma，PPGL)的诊断路径及诊断准确性等。除了在上述领域外，质谱技术也在在蛋白质、肽类激素方面、蛋白标志物的定量检检测方面也取得了突破性的进展。本文将对质谱技术在雄激素检测方面进行介绍。

　　性激素分为雌激素和雄激素，雌激素包括雌酮、雌二醇和雌三醇，激素主要包括睾酮、双氢睾酮、雄烯二酮、脱氢表雄酮和脱氢表雄酮硫酸盐。睾酮是人体内主要的雄性激素，由男性的睾丸或女性的卵巢分泌，肾上腺亦分泌少量睾酮，具有维持肌肉强度及质量、维持骨质密度及强度、提神及提升体能等作用。目前，质谱分析方法已经被确定为雄激素测定的“金标准”，它解决了既往检测方法低阈值低灵敏度的问题，该方法也可为睾酮提供试剂盒以及为激素水平的测定提供标准参照。目前，世界上已有三个实验室获得批准进行建立LC-MS的标准RMP（reference measurement procedure）测定方法测定睾酮。其中2个在欧洲，使用同位素稀释气相色谱-质谱法ID-GC/MS-MS，另外一个在美国NIST（National Institute of Standards and Technology）实验室，使用基于同位素稀释液相色谱串联质谱ID-LC/MS-MS为常规测定方法提供试剂盒、测量参考标准的和高水准校准。据NIST报道，使用ID-LC/MS-MS分析的睾酮测定下线范围可达到1-8 ng/dL（0.035-0.30 nM），刚好满足妇女睾酮测定的需要。国外一些学者采用4种常规免疫测量法与LC-MS对健康受试者进行睾酮的测量结果进行比较，发现在4种常规免疫测定法与LC-MS法结果比较中，只有1种免疫测定法在测定女性的睾酮与孕酮<1mg/L与LCMS结果有相关性，而其余3种测定结果与LC/MS测出的结果均有较大差异。结果表明，常规免疫法在测定女性低浓度循环类固醇时明显受限，而LC-MS方法更值得信赖。此外，很多学者采用改进的LC/MS-MS方法以增强睾酮测量的敏感性。例如有学者采用同位素稀释法大大增强了LC/MS-MS的敏感性，通过配合丹酰基氯化物衍生作用，可降低雄激素间内部代谢产物干扰，从而提高检测的灵敏性和精准性。

　　目前，临床质谱发展火热，很多医院将质谱作为检验科标配，质谱的普及对临床诊断准确性的提高具有重要意义。准确的测量结果可以让临床医生更加准确的诠释临床意义，为精准治疗打下基础。

质谱临床激素

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