一文看懂液相色谱仪（二）
溶剂的选择：
所有不锈钢、钛合金、及宝石PCTFE聚三氟氯乙烯、PTFE聚四氟乙烯、peek聚醚醚酮等材质制造的部件都长期浸泡在溶剂中。
必须使用与管道材质匹配的标准试剂盒缓冲盐溶液。特别注意类似高粘度、低沸点、有紫外吸收(UV-VIS检测器)、高折射率(RID检测器)及可挥发溶剂(脱气机)
高浓度缓冲盐溶剂，通常最大不超过1moL/L，使用时应确认后密封清洗系统运行再正确的清洗溶剂上。
自动进样器大致分为两类不带温控的自动进样器和带温控的自动进样器，对于可进行温控的自动进样器要注意及时清理冷凝水，定期清洗样品盘避免进样针堵塞
针座漏液需要更换针座密封，针座堵了可以通过反冲的方式解决。
进样阀如漏液需更换进样阀转子密封等组件。
7、柱温箱的维护
一般没有需要特殊维护的地方
8、检测器的维护
检测器需要维护的部件主要是灯和流通池。定期检测灯能量，必要时更换灯。当结果谱图出现异常时确认是否是流通池污染导致的，及时清洗流通池。
常见问题及解决方案：
压力问题
1、压力低
(1)低粘度流动相 解决办法：使用Kozeny-Carmen或类似方程计算预期压力
(2)活塞密封垫泄漏 解决办法：检查是否存在漏液现象，必要时更换相关部件
(3)系统泄漏 解决办法：检查是否有漏液，拧紧或更换相关漏液部件
(4)系统中有气泡 解决办法：确保溶剂瓶或溶剂管线经过完全灌洗，且purging阀完全关闭，脱气机正常工作。
(5)溶剂过滤吸头、单向阀及管线等压力传感器之前的部件堵塞。解决办法：用分段排除法检查系统管路是否堵塞。
(6)泵流速故障 解决办法：用计量过的器皿判断泵流量是否准确，确认故障报修。
2、压力高
(1)高粘度流动相 解决办法：使用Kozeny-Carmen或类似方程计算预期压力
(2)泵流速故障 解决办法：用计量过的器皿判断泵流量是否准确，确认故障报修。
(3)压力传感器之后的管路堵塞、检测器流通池、自动进样器进样针或针座堵塞。解决办法：用分段排除法确定堵塞的位置，冲洗(反冲)或更换相关部件。
(4)保护柱或分析柱堵塞。解决办法：冲洗(反冲)或更换相保护柱或分析柱。
3、压力波动
(1)单向阀堵塞造成 解决办法：超声清洗单向阀
(2)管路中有气泡 解决办法：重新purge管路
二、基线问题
1、基线波动、基线漂移
(1)系统未平衡 解决办法：至少10倍柱体积平衡系统。注意室温是否稳定避免空调出风口直吹仪器。
(2)流通池中有气泡 解决办法:冲洗流通池
(3)保护柱被污染 解决办法：更换保护柱
(4)检测器污染 解决办法：按照厂商要求清洗流通池
(5)溶剂被污染 解决办法：更换溶剂
(6)检测器灯能量低 解决办法:更换相关灯
(7)梯度洗脱 解决办法：使用纯度更高的溶剂或选择其他波长，如还存此情况属正常现象
(8)系统泄漏 解决办法：检查泄漏位置，拧紧或更换泄漏处部件。
(9)温度波动 解决办法：使用柱温箱，如条件要求苛刻可使用柱前加热模块及柱后冷却模块。控制室温，避免空调出风口直吹仪器。
(10)色谱柱污染 解决办法：更换保护柱必要时更换分析柱
(11)泵未适当混合溶剂 解决办法;等度洗手动混合，在梯度洗脱时如仪器为低压系统确保比例阀正常工作，如仪器时高压系统确保泵流速精准混合器正常工作。
(12)溶剂过滤器堵塞 解决办法：超声(浸泡)清洗溶剂过滤器，应注意材质是否可以超声。
三、峰形问题
1、峰展宽
系统未平衡 解决办法：用至少10倍柱体积平衡系统
进样溶剂过强 解决办法：确保进样溶剂强度与流动相强度相当或更弱
进样体积过高 解决办法：减少进样体积
柱外体积过高 解决办法：减小样品浓度
温度波动 解决办法：使用柱温箱
保护柱污染或失效 解决办法：更换新的保护柱
分析柱污染或失效 解决办法：冲洗色谱柱必要时更换色谱柱
柱外体积过大样品扩散 解决办法：减小柱外体积
2、双峰
(1)色谱柱过旧，色谱柱填料有塌陷，柱校低 解决办法：更换色谱柱
(2)色谱柱污染 解决办法：冲洗色谱柱
3、倒峰
(1)溶剂被污染或进样溶剂紫外吸收比流动相低 解决办法：更换新配置的溶剂，第二种情况可以忽略
(2)检测器信号正负极设置反了，此时峰全部为负 解决办法：更改检测器设置
(3)RI检测器未平衡 按厂商要求平衡系统
4、平头峰
(1)检测器过载 解决办法：减小样品浓度
(2)检测器设置 解决办法：检查检测器衰减并重新校零
5、峰拖尾
(1)保护柱过旧 解决办法：更换保护柱
(2)色谱柱过载 解决办法：减小进样体积或减小进样浓度
(3)色谱柱柱校低 解决办法：更换色谱柱，对于有极性基团容易与流动相产生氢键易拖尾的化合物，可选择双重封端的色谱柱，或在不影响分析结果的情况下，加入扫尾剂，改善峰行。
(4)色谱柱污染 解决办法：冲洗甚至更换色谱柱
6、峰前沿
(1)溶剂效应 解决办法：更换进样溶剂确保进样溶剂强度与流动相相当或更弱
(2)色谱柱过载 解决办法：减小进样体积或浓度
7、峰面积重现性不好
(1)峰面积减小，样品降解解决办法：新配置样品，对温度敏感的生物样品应使用可控温的自动进样器
(2)峰面积过小，样品浓度过低，解决办法：增大样品浓度
(3)检测器设置，选择合适的检测波长
(4)进样量错误 解决办法：检查调整进样针高度确保进样量准确，计量泵正常工作
(5)样品粘度太大 解决办法：延长注射器的吸液时间
(6)检测器灯能量低 解决办法：更换灯
8、鬼峰
系统中存在污染 解决办法：排查溶剂、流动相、分析柱、保护柱、检测器、自动进样器、管路等，冲洗或更换被污染的试剂或原件。
保留时间漂移
系统未平衡好 解决办法：延长平衡时间
系统漏液 解决办法：检查漏液位置，拧紧或更换接头或管线
温度波动 解决办法：使用柱温箱，控制室温，避免空调直吹仪器
泵流量有误差 解决办法：联系报修
比例阀或混合器故障 解决办法：联系报修
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