2.2 PD-1+CD8+ T 细胞比例高的人，对免疫治疗反应较好对非小细胞肺癌患者，用 PD-1 免疫阻断剂治疗时， PD-1+CD8+细胞比例高的人，对免疫治疗反应较好【3】，见图 6-7。

图 6.对于免疫治疗有反应的患者， PD-1T （高表达） TILs 细胞在所有细胞中的比例和单位面积的数量均高于没有反应的患者【3】。
 

图 7. PD-1T （高表达） TILs 细胞＞1%的患者，总体生存率（OS）要高于＜1%的患者【3】。

2.3 液体活检研究稀有免疫细胞

以往 TILs 的分离仅能从肿瘤组织中获取，但组织切片的获取具有很多不便性及侵入性。现在， 与肿瘤组织内部的 TILs 细胞一样，在患者的外周血里也能发现与 TILs 一致的 PD-1+CD8+的 T 细胞（图 8）。 肿瘤细胞的刺激使淋巴系统产生大量的功能性免疫细胞，再运送到肿瘤组织周围，所以在外周血中就可以获取与 TILs 一致的免疫细胞。 研究外周血循环中的 CD8+ T 细胞上的 PD-1 表达，为研究肿瘤组织内部的抗肿瘤 T 细胞提供了一扇窗户，也成为进行免疫治疗的标志物， 有助于分离出对肿瘤有反应的 CD8+ T 细胞，进行免疫治疗【1】。

图 8.外周血循环中可以分离出新抗原特异性的 PD-1+ T 细胞【1】。

2.4 流式细胞仪很难检测到外周血中的稀有免疫细胞

图 9. 在黑色素瘤患者的外周血中，也能发现新抗原特异性的淋巴细胞。与肿瘤组织内部
 

相比，外周血（PBMC）中的 PD-1+CD8+的 T 细胞数量非常少，流式细胞仪几乎无法检测到【4】。

（三） MiSelect R 检测稀有免疫细胞

3.1 MiSelect R 的高灵敏度

由于 MiSelect R 的创新性设计， 其对稀有细胞的捕获和鉴定具有高特异性和高灵敏度， 对于细胞数很稀少的族群 (<100 cells/mL) ， 流式细胞仪已经无法检测到，而MiSelect R 可以检测（图 10）【5】。 因此可以用 MiSelect R 来检测极微量的外周血中的稀有免疫细胞。
 

图 10. 对于细胞数很稀少的族群 (＜100 cells/mL) ， 流式细胞仪已经无法检测到，而MiSelect R 可以检测到； 而对于＞100 cells/mL 的族群， MiSelect R 检测到的细胞数量，几乎是流式的 2 倍以上，说明 MiSelect R 的灵敏度比流式更高【5】。

3.2 外周血稀有免疫细胞数量对疗效的影响
 

科学家研究了“肝细胞癌”和“肾细胞癌”的 anti-PD1（Keytruda） 免疫治疗， 对 36名“肝细胞癌”患者和 10 名“肾细胞癌”患者， 在免疫治疗之前抽取患者的外周血， 用MiSelect R 检测稀有免疫细胞的数量。实验结果表明： 外周血里稀有 PD-1+CD8+ T 细胞和PD1+CD4+ T 细胞数目多的患者，其总生存率（OS）和无进展生存率（PFS）均明显高于此类稀有 T 细胞数目少的患者（图 11-13）【5】。
 

图 11.肝细胞癌患者的外周血稀有 PD-1+CD8+ T 细胞（攻击性 T 细胞） 数目与 OS 的关系【5】。


图 12.肝细胞癌的外周血稀有 PD-1+CD8+ T 细胞（攻击性 T 细胞） 数目与 PFS 的关系【 5】。