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为什么PCR跑不出来,都弥散了

2023.5.17

弥散的原因比较多:
1、PCR产物是否在扩增结束后立即进行电泳,电泳液是否是新鲜的,如果不是很可能导致扩增产物降解。
2、PCR体系没摸索出来,用正交试验找出正确的PCR体系,不要单纯根据别人的试验资料去做,不要太相信文章中的数据,谁都会保护自己的试验结果和数据的。
3、扩增所用的引物设计的不好,找别人帮你看看,或者找生物公司帮你设计。如果是通用引物也要确定你所要扩增的基本是高度保守的。
4、模板的问题,你用的模板是否降解了。是DNA做模板,还是RNA做模板。
最后,如果你扩增初的是多条带那就可能是引物特异性不强或者退火温度太低。如果你在摸索完条件后还是出现完全是弥散的现象建议最好换引物。

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