丙氨酰谷氨酰胺注射液的检查及鉴别方法

鉴别

(1)取本品1ml,加水10ml,加茚三酮试液5滴,加热,即显蓝紫色。(2)在含量测定项下记录的色谱图中,供试品溶液主峰的保留时间应与对照品溶液主峰的保留时间一致

检查

pH值应为5.4~6.0(通则0631)。吸光度取本品,照紫外可见分光光度法(通则0401),在400mm的波长处测定,吸光度不得过0.05氨照紫外可见分光光度法(通则0401)测定。试验应在20~25℃进行。供试品溶液精密量取本品5ml,置50ml量瓶中,用水稀释至刻度,摇匀。对照品溶液取氯化铵29.7mg,精密称定,置500ml量瓶中,加水适量使溶解并稀释至刻度,摇匀(每1ml中相当于g的NH测定法精密量取还原酶Ⅰ溶液(NADH(取还原型辅酶I适量,用2-氧代戊二酸缓冲液制成每1ml中含0.2mg的溶液。该溶液4℃可保存3天)1.0ml,置吸收池中,加供试品溶液0.1m1和水1.9ml,混匀,反应5分钟。以水为参比,在340nm的波长处测定吸光度A1,再加入谷氨酸脱氢酶溶液(GLDH(取谷氨酸脱氢酶适量,加水稀释制成每1m中含1000单位的溶液)0.02ml,混匀,20分钟后测定吸光度A2。同法测定水和对照品溶液的吸光度,分别为B1、B2和C1、C2。按下式计算(A1-A2)-(B1-B2)C(mg/L)=CsX(C1-C2)-(B1-B2)×10式中Ca为对照品溶液的氨浓度,pg/ml;10为供试品溶液的稀释倍数。限度含氨不得过340mg/I有关物质照高效液相色谱法(通则0512)测定供试品溶液精密量取本品,用流动相定量稀释制成每lml中约含丙氨酰谷氨酰胺4mg的溶液对照品溶液取主成分与各杂质对照品适量,分别精密称定,按下表的浓度加流动相溶解并定量稀释制成。主成分与杂质对照品浓度(g/m)环-(L丙氨酰-L谷氨酰胺环-(L丙氨酰-L谷氨酸)2L焦谷氨酰L丙氨酸渗透压摩尔浓度的测定用标准溶液的制备分别精密称取500~650℃干燥40~50分钟并置硅胶干燥器中放冷」100ml,摇匀(渗透压摩尔浓度分别为1000、2000 mOsmol/kg)。续表主成分与杂质对照品浓度(Hg/ml)L焦谷氨酸D丙氨酰L谷氨酰胺丙氨酰谷氨酰胺L-丙氨酰-L谷氨酸色谱条件、系统适用性要求与测定法见丙氨酰谷氨酰胺有关物质项下限度供试品溶液色谱图中如有杂质峰,按外标法以峰面积计算,各杂质含量与主成分标示量比较,含环(L丙氨酰L-谷氨酰胺)不得过5.0%、含环-(L-丙氨酰-L谷氨酸)不得过0.05%、含L焦谷氨酰L丙氨酸不得过0.65%、含L焦谷氨酸不得过0.25%、含D丙氨酰L谷氨酰胺不得过0.25%、含L丙氨酰L谷氨酸不得过1.0%;其他单个未知杂质按外标法以丙氨酸谷氨酰胺峰面积计算,不得过0.5%,其他未知杂质总和不得过1.0%。重金属取本品适量(约相当于丙氨酰谷氨酰胺2.0g)加醋酸盐缓冲液(pH3.5)2ml,加水适量使成25ml,依法检查通则0821第一法),含重金属不得过百万分之十渗透压摩尔浓度应为900~1180 mOsmol/kg(通则0632)。0细菌内毒素取本品,依法检查(通则1143),每1m中含内毒素的量应小于0.50EU无菌取本品,经薄膜过滤法处理,用0.1%无菌蛋白胨水溶液冲洗(每膜不少于100ml),以金黄色葡萄球菌为阳性对照菌,依法检查(通则1101),应符合规定其他应符合注射剂项下有关的各项规定(通则0102)。