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电子扫描显微镜制样中的清洗

2018.6.27

清洗

1.完整的制样程序中有三次清洗

固定前清洗:洗去表面的灰尘、黏液等附着物,确保获得清洁的观察表面。

前固定后清洗:洗净醛类固定液,以免戊二醛与锇酸反应而削弱锇酸的固定效果。

脱水前的清洗:洗净固定液,以免与脱水剂反应产生沉淀影响观察效果。

 

2.清洗液的类型与选择:蒸馏水、生理盐水、加酶清洗液等

选择原则:清洗液的pH值、渗透压、温度应该尽量接近样品材料的生理值,以免样品因环境突变而产生形变。

植物材料:蒸馏水洗净尘埃;

动物材料:等渗生理盐水、5%碳酸钠或缓冲液洗去黏液等;

游离细胞:用等渗的缓冲液清洗(精子、血细胞、微生物);

覆盖大量黏液的样品(胃黏膜)用低浓度的蛋白水解酶溶液洗;

组织培养细胞:用相应的培养液清洗;

特殊样品:如乳腺组织富含蛋白质和脂类,分别用16%的甘油和20%乙醇浸泡清洗;

表面附着蜡质、角质层的样品:用有机溶剂脱蜡。

 

3.清洗方法:不同材料采用不同方法,灵活应用

(1)植物材料:根部水冲洗去泥土,地上部用水冲洗或滴洗。观察气孔状态时应注意清洗后取材时机。

(2)较干净的样品:固定后20倍体积的清洗液轻摇,换液三次。

(3)表面附着大量黏液的样品:振荡法或喷射瓶壁加压冲洗。

(4)游离细胞、微生物:离心法清洗。

(5)超声波清洗:用于表面结构复杂、凹陷、皱折多的样品。样品置清洗液中,超声波清洗器内清洗,必须控制功率

(6)灌流清洗:观察管腔内壁结构的样品,避免血液、组织液凝聚而影响观察效果。通过动脉注入清洗液,直到排出液变清为止。必须控制压力


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