磷酸氟达拉滨的检查方法

酸度取本品0.10g,加水20ml溶解后,依法测定(通则0631),pH值应为1.5~2.5溶液的澄清度与颜色取本品0.10g,加水20ml溶解后,溶液应澄清;如显色,与黄色1号标准比色液(通则0901第一法)比较,不得更深。氯化物取本品30mg,依法检查(通则0801),与标准氯化钠溶液6.0ml制成的对照溶液比较,不得更浓(0.2%)游离磷酸盐取本品约10mg,精密称定,置10ml纳氏比色管中,加水2ml,微热使溶解,作为供试品溶液;精密量取水2ml,置10ml纳氏比色管中,作为空白溶液;精密量取对照溶液(精密称取磷酸二氢钾适量,加水溶解并定量稀释制成每ml中含0.716mg的溶液,精密量取1ml,置100m1量瓶中,加水稀释至刻度,摇匀)2m1,置10ml纳氏比色管中,作为标准溶液。

分别在标准溶液、空白溶液与供试品溶液中加入钒钼试剂(称取钼酸铵4g和钒酸铵0.1g,置150ml烧杯中,加水7oml,搅拌使溶解,加硝酸20ml,混匀,放冷,加水稀释至100ml,摇匀)2ml,摇匀,放置2分钟,以白色为背景,自上向下观察,标准溶液的颜色应比空白溶液的颜色深,供试品溶液如显色,其颜色与标准液比较,不得更深(0.1%)。钠盐取本品50mg,置100ml量瓶中,加水溶解并稀释至刻度,摇匀,作为供试品溶液;另量取标准氯化钠溶液(精密称取在105℃干燥2小时的氯化钠127mg,置1000ml量瓶中,加水溶解并稀释至刻度,摇匀)1.0ml,置50m1量瓶中,加供试品溶液稀释至刻度,摇匀,作为对照品溶液。照原子吸收分光光度法(通则0406第二法)在589.0nm的波长处分别测定,应符合规定(0.2%)。有关物质照高效液相色谱法(通则0512)测定。临用新制。有关物质I(测定相对保留时间小于1.0的杂质)供试品溶液取本品适量,加流动相溶解并定量稀释制成每1ml中约含1mg的溶液对照溶液精密量取供试品溶液适量,用流动相定量稀释制成每1ml中约含2g的溶液。系统适用性溶液取本品约10mg,加0.1mol/L盐酸溶液10ml使溶解,置80℃水浴中加热15分钟,使产生降解产物杂质I和杂质Ⅱ,取出,放冷。

灵敏度溶液精密量取对照溶液适量,用流动相定量稀释制成每1ml中约含0.2g的溶液。色谱条件用十八烷基硅烷键合硅胶( Diamonsil o18色谱柱,4.6mm×150mm,5pm或效能相当的色谱柱)为填充剂,以0.01mol/L磷酸二氢钾溶液-甲醇(94:6)为流动相,检测则波长为260nm;进样体积10l系统适用性要求系统适用性溶液色谱图中,氟达拉滨峰的保留时间约为10分钟,按杂质I、杂质Ⅱ与氟达拉滨顺序出峰(相对保留时间依次约为0.26、0.34与1.0),杂质Ⅰ峰与杂质Ⅱ峰之间的分离度应不小于2.0。灵敏度溶液色谱图中,主成分色谱峰峰高的信噪比应大于10。测定法精密量取供试品溶液与对照溶液,分别注人液相色谱仪,记录色谱图至主成分峰保留时间的4倍。限度供试品溶液色谱图中如有杂质峰,杂质I校正后的峰面积(乘以校正因子4.0)不得大于对照溶液主峰面积的4倍(0.8%)、杂质Ⅱ校正后的峰面积(乘以校正因子5)不得大于对照溶液的主峰面积(0.2%),相对保留时间约为0.42的杂质校正后的峰面积(乘以校正因子1.9)不得 大于对照溶液主峰面积的2倍(0.4%),其他单个未知杂质峰面积均不得大于对照溶液主峰面积的0.5倍(0.1%)。供试品溶液色谱图中小于灵敏度溶液主峰面积的峰忽略不计(0.02%)。有关物质Ⅱ(测定相对保留时间大于1.0的杂质)供试品溶液、对照溶液与灵敏度溶液见有关物质Ⅰ项下。

系统适用性溶液取磷酸氟达拉滨系统适用性对照品(含磷酸氟达拉滨和杂质Ⅲ适量)适量,加流动相溶解并稀释制成每1m中含磷酸氟达拉滨约1mg的溶液。色谱条件用十八烷基硅烷键合硅胶( ZORBAXpseXDB-C18色谱柱,4.6mm×250mm,5m或效能相当的色谱柱)为填充剂,以0.01mol/L磷酸二氢钾溶液-甲醇(80:20)为流动相,检测波长为260nm;进样体积10l。系统适用性要求供试品溶液色谱图中,氟达拉滨峰的保留时间约为3分钟,氟达拉滨峰与杂质Ⅲ峰(相对保留时间约为1.5)的分离度应不小于5.0。灵敏度溶液色谱图中,主成分色谱峰峰高的信噪比应大于10。

测定法精密量取供试品溶液与对照溶液,分别注入液相色谱仪,记录色谱图至主成分峰保留时间的5倍限度供试品溶液色谱图中如有杂质峰,杂质Ⅲ校正后的峰面积(乘以校正因子0.5)不得大于对照溶液主峰面积的0.5倍(0.1%),相对保留时间约为1.9的杂质校正后的峰面积(乘以校正因子0.6)不得大于对照溶液的主峰面积(.2%),相对保留时间约为2.5的杂质校正后的峰面积(乘以校正因子1.8)不得大于对照溶液的主峰面积(0.2%),其他单个未知杂质峰面积均不得大于对照溶液主峰面积的0.5倍(0.1%),供试品溶液色谱图中小于灵敏度溶液主峰面积的峰忽略不计(0.02%)限度(包括有关物质Ⅰ和有关物质Ⅱ)供试品溶液色谱图中,各未知杂质峰面积之和不得大于对照溶液主峰面积的2.5倍(0.5%),各杂质校正后的峰面积之和不得大于对照溶液主峰面积的7.5倍(1.5%),供试品溶液色谱图中小于灵敏度溶液主峰面积的峰忽略不计(0.02%)残留溶剂照残留溶剂测定法(通则0861)测定,应符合规定水分取本品,照水分测定法(通则0832第一法1)测定,含水分不得过3.0%重金属取本品0.5g,置50ml比色管中,加水20ml和醋酸盐缓冲液(pH3.5)2ml,加热使溶解,放冷,加水至25ml,依法检查(通则0821第一法),含重金属不得过百万分之二十