植物组织化学显微镜标本片制作方法_压片法
| 实验方法原理 | 将植物的幼嫩器官如根尖、茎尖和幼叶等经过处理后，被涂抹或压在载玻片上，使组织成一薄层然后进行观察的制片方法。染色后可做临时的观察标本，也可以经过脱水、透明等步骤制成永久的玻片标本。 |
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| 实验材料 | |
| 试剂、试剂盒 | |
| 仪器、耗材 | |
| 实验步骤 | 1 幼根的培养 取洋葱或大蒜的鳞茎置于广口瓶上，瓶中盛满清水，使洋葱或大蒜的下部（鳞茎盘）浸人水中，置于温度在 20-25℃的温暖处，并注意每天换水， 3-5d 后，即可长出幼根。 2 材料的固定和离析 先用等量的浓盐酸和 95%酒粘配成混合液，这种溶液既能迅速杀死细胞并保 其细胞结构接近于生活状态，又能溶解细胞间的中胶层，在压片时使细胞易于分散，故称其为固定离析液。当上述幼根长到 2-3cm 时，即可进行固定和离析处理。具体方法是在上午 10-11 点之间，将 3mm 左右的根尖剪下，立即投入上述固定离析液中，经 3-5min, 取出放入清水中漂洗几次即可制片。也可经过 50%的酒精后将其保存在 70%酒精中保存备用（在 4℃冰箱中可保存 7-10d) 。 3 压片的制作 取一个经过固定离析的根尖，放在干净的载玻片上，加一滴 0.5% 的龙胆紫染液染色2min, 用解剖针轻轻将根尖压裂，再盖上盖玻片，用右手大拇指对准盖玻片下的材料，垂直均匀用力下压，将材料压成均匀的、单层细胞的薄层，用吸水纸条吸去溢出的染液即可在显微镜下观察，这时可以看到许多离散的各个分裂时期的细胞。若染色过浅，可在盖玻片一侧冉加一滴染液染色；如果染色过深，可在盖玻片一侧加一滴 45%的乙酸进行褪色。 上述压片也可用小麦、水稻的颖果和蚕豆等种子萌发出根后制作。但要注意不同植物根尖细胞有丝分裂活动的高峰是不同的，所以取材固定的时间也不一样，如小麦在上午 11 时至下午 1 时，水稻在下午 4 时左右，玉米和蚕豆除在上午有一个高峰外，若下午进行实验，可于 3-4 时固定，也可获得分裂相较多的根尖细胞有丝分裂压片标本。如果是事先固定的材料，上课时分发给学生使用，则可于午夜 12 时取材，分裂相更多。若将材料用秋水仙素进行预处理和低温固定，所制得的压片中细胞分裂相会更好，且染色体清晰可见，可用丁观察细胞染色体的形态、数目和组型分析。 展开 |
