高效液相色谱仪色谱柱的填充物如何添进去?
1.所有材料均达到规定温度。
2.用所需的溶液冲洗柱底部以除去气泡,并确保柱网下没有气泡关闭色谱柱出口,并将1-2cm的缓冲液留在柱管中。
3.温和重悬填充物。
4.估计需要的悬浊液(重悬的填充物)总量。
5.向塔中加入所需体积的混合物,并用玻璃棒排干,以免产生气泡。
6.立即用该栏填充缓冲区。
7.安装立柱顶部并将立柱连接至泵。
8.打开柱口,设定泵的流量。如果混合物的体积大于柱的体积,则应连接一个额外的玻璃柱以供储存。这样使得混合物在填充时的直径维持恒定,从而减少紊流并提高柱子的填充状态。
9.在达到柱床高度后,保持填料流量至少为柱体积的3倍,并在柱上标记柱床的高度。
10.关闭泵和塔出口,取下上盖,向塔内注入缓冲液,使其向上凸起。
11.将接头以一定角度插入到柱中以确保网下无气泡。
12.沿立柱向下滑动接头(打开接头出口),直到达到标记的位置,并且接头已锁定并填满。
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