细胞培养--原代培养的操作步骤
混匀操作要领
（1）火焰消毒吸管，用Hanks液冷却和湿润管内壁（这是因为刚分离的组织细胞易粘在管壁上）
（2）吸管头插入管底
（3）用吸管反复轻轻吹打组织块
器械的使用
（1）用工作台消毒镊子取浸泡在酒精中消毒的器械。
（2）器械置无菌干纱布内嚓一下。迅速通过火焰，冷却后使用。
（3）用过的器械置另一加盖的器皿中再消毒。
（4）器械按浸泡消毒的顺序使用。
（5）各套再消毒器械不可混用。
除去组织块多余水分
用吸管将组织块推向青霉素瓶一角，然后将有组织块的瓶面翻向上方，吸去流向对侧的多余水分。
注意：多余水分若不除去，会使组织块剪切不细，消化后的细胞悬液清亮（细胞数少），并可见消化液中有线状或絮状物漂浮。
细胞计数
（1）用吸管混匀待计数的细胞悬液。
（2）将一小滴细胞悬液从盖玻片与载玻片交界部位滴入细胞计数池中。
（3）沉降1分钟，低倍镜下计数血球计数板四大中格的结构完整的细胞，小细胞团计数为1。
（4）计数时，如果细胞压在格上，则数上不数下，数左不数右。然后按下式计算出每毫升悬液中的细胞数。
（四大中格细胞数/4）*10000=细胞数/毫升。
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