GB/T 5750.12-2023《生活饮用水标准检验方法 第12部分：微生物指标》内容解读
GB/T 5750-2023《生活饮用水标准检验方法》于2023年3月17日由国家市场监督管理总局（国家标准化管理委员会）批准发布，以替代实施16年之久的GB/T 5750-2006《生活饮用水标准检验方法》，新标准将于2023年10月1日起正式实施。
本文针对GB/T 5750.12-2023 《生活饮用水标准检验方法 第12部分：微生物指标》中微生物检测指标和检测方法等内容的变化进行解读。
水质检测的重要性
水是生命之源，是生存之本。而在水体中，只要条件合适，极易引起微生物生长，进而污染水体本身，对生态环境及人们的健康造成威胁。尤其在生活饮用水中，滋生的病原微生物易引发人体肠道功能紊乱，发生呕吐、腹泻等病理性疾病，严重时可能危及生命，因此水质微生物检测至关重要。
水中微生物检测最新法规变化
相较于GB/T 5750.12-2006，GB/T 5750.12-2023中增加了以下检测指标和检测方法，以提升对水质的监控。
新增两类微生物检测指标
肠球菌及产气荚膜梭状芽胞杆菌
两类微生物指标虽在GB/T 5749.12-2006版《生活饮用水卫生检测标准》中即规定了在饮用水中的参考限值，但并未规定检测方法。GB/T 5750.12-2023中增加了两类微生物的检测指标及检测方法，进一步加强了国家对生活饮用水水质微生物的控制要求（表1）。
◉肠球菌（新增）——增加了多管发酵法和滤膜法；
◉产气荚膜梭状芽胞杆菌（新增）——增加了滤膜法。
新增了菌落总数和两虫相关检测方法
GB/T 5750.12-2023对部分微生物指标的检测方法进行了方法新增，新增方法在一定程度上简化了微生物检测步骤，提升检测效率（表1）。其中贾第鞭毛虫和隐孢子虫（两虫）在GB/T 5749-2006版中属于非常规性指标，而在新规GB/T 5749-2022中则延伸为扩展性指标，可见两虫检测的重要性。
◉ 菌落总数——增加了酶底物法；
◉ 两虫检测——增加了滤膜浓缩/密度梯度分离荧光抗体法。
表1：GB检测方法调整对比
注：橙色字体为新增微生物指标及检测方法
微生物定义更明确
菌落总数的定义从原有的“水样在营养琼脂上有氧条件下37℃培养48h后，所得1ml水样所含菌落的总数”，变更为在“一定条件下、经一定时间培养后所得1mL水样中的微生物菌落个数”，定义更简略，适用范围更广；总大肠菌群的定义在新版国标中未写明结论，但需要进行证实实验及革兰氏染色结果判定，定义更简洁，但其中富含的信息更多样；对于耐热大肠菌群的定义直接明确培养温度，简单明了；而两虫在最新修订版中除了常规定义外，还细化了两虫外形特征的描述，以便更好地观察（表2）。
表2：GB部分微生物指标定义差异对比
注：橙色字体为定义差异变化
部分检测方法新增质量控制要求
GB/T 5750.12-2023对于部分检测方法或方法涉及的培养基要求等增加了质量控制内容。质量控制内容主要包括培养基检验及对照试验要求。
4.1 菌落总数
在新版GB/T 5750.12-2023中，对新增酶底物法主要规范了培养基验证质量控制环节，具体内容如下表3。
表3：菌落总数酶底物法培养基质量控制
4.2 两虫测试
两虫测试中的免疫磁分离荧光法质量控制要求在旧版和新版国标中类似，仅验证测试的周期及阴性对照使用的水质存在差异，而新增的滤膜浓缩/密度梯度分离荧光抗体法质量控制过程与免疫磁分离荧光法具有较大区别，具体差异如表4。
表4：两虫在新旧国标及方法上质量控制差异
4.3 肠球菌及产气荚膜梭状芽胞杆菌检测
在GB/T 5750.12-2023中，肠球菌属于新增检测指标，其包含多管发酵法和滤膜法两种检测方法；与肠球菌相同，产气荚膜梭状芽孢杆菌同为新增检测指标。两种新增指标所涉及质量控制环节内容均包括培养基检验及对照试验，具体内容见表5。
表5：肠球菌及产气荚膜梭状芽胞杆菌
