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动物细胞培养——无菌技术II:准备培养基

2019.4.05
实验方法原理目的

操作已灭菌溶液时保持无菌状态。

训练目标

无菌操作:练习灵巧和无菌的操作。

监督:连续监督。

背景信息

无菌技术的目标(见 6.1 节);无菌环境的要素(见 6.2 节);无菌操作(见 6.3 节).在层流超净台中工作(见 6.4 节);可见的微生物污染物(见 19.3.1 节).

示范材料和操作:示范如何擦拭工作面和将物品拿人超净台。解释层流超净台和空气微粒过滤器的工作原理。给实习生示范如何打开和盖上培养瓶和试剂瓶的盖子,以及如何在工作面上摆放盖子。示范如何握持吸管,将其插人移液器,如何使它不碰到任何未灭菌的东西以免被污染,如何在无菌条件下转移液体,如何在移液时倾斜试剂瓶和培养瓶。强调清理和擦拭超净台并检夜卜作面下部.

练习

概要

向 I X 培养基储液中加人必需的添加剂和补充成分。

标准方案

用 I X 储存液制备培养基(见方案11.7)。

标准方案的实脸补充

1)向2个已灭菌试剂瓶中分别加人soml培养基.

2)将·个试剂瓶放置在4℃。

3)将另一个试剂瓶解育1周,观察有没有污染迹象(见19.3,1节)。

4)在练习4中使用这些瓶子。


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