磁珠分选与流式分选该如何选择?
目前常见的分选方法有两种,一种是流式分选,一种是磁珠分选,两种方案各有优势,下面我们分别来了解一下。
1、什么是MACS 磁性分选?
答:首先使用磁珠偶联的抗体去标记细胞,然后把标记好的细胞过分选柱(分选柱周围会有磁铁),带磁珠的细胞就留在柱子上,不带磁珠的细胞就流走了,从而实现分选,需要搭配分选器。
2、什么是FCS流式分选?
答:流式分选一般都是电荷式分选,即对感兴趣的目标细胞所在的液滴充上电荷,液滴经过电极板,通过电场作用发生偏转,从而实现分选,需要搭配流式分选仪。
3、MACS磁性分选与FACS流式分选的比较?
- | FAC流式分选 | MACS磁珠分选 |
分选时间 | 平均每秒获得70000个细胞 108 cells ≥2 3 min 109 cells ≥4 h (FACS Aria) | 平均每秒钟处理107个细胞 108 cells => 5 min 109 cells => 5 min (autoMACS™ 分选仪) |
分选纯度 | ≈90% | ≈95% |
细胞回收率 | ≈80% | ≈90% |
操作方面 | 需要丰富经验的操作人员 | 无需专门培训,可即时使用 |
分选后细胞无菌状态 | 机器消毒不彻底容易染菌 | 仪器小巧可放在无菌操作台中 可以更好保证无菌 |
分选后结果可靠性 | 流式分选以及对后续的细胞进行流式分析是同一条件 | MACS分选后,用流式细胞仪检测,与后续检测结果呈双盲性 |
多参数分选 | 可以同时进行三色以上分选 | 可以进行两个指标的分选 |
胞内荧光分选 | 可以 | 不可以 |
低表达群细胞分选 | 可以 | 需要预先富集 |
4、能够分选哪些细胞?
5、应用领域
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