抗球蛋白试验(AGT)
直接抗球蛋白试验（DAT）是诊断自身免疫性溶血性贫血的首选实验。Coombs 于1945 年建立该试验，将人血清注射到兔子体内，得到兔抗人血清蛋白抗体，也称为抗人抗体。如果患者红细胞表面包被了免疫球蛋白或补体，加入抗人抗体可引起红细胞凝集，称为Coombs试验阳性或直接抗球蛋白试验阳性。如果患者贫血，Coombs 试验阳性提示免疫性溶血性贫血。
注：AIHA：自身免疫性溶血性贫血；CAS：冷凝集素综合征；PCH：阵发性冷性血红蛋白尿
DAT 阳性并不等于自身免疫性溶血性贫血。有时患者DAT 阳性但并不存在溶血，如一些老年人、系统性红斑狼疮（systemic lupus erythematosus，SLE）患者、人类免疫缺陷病毒（hu man immunodeficiency virus，HIV）感染者、多发性骨髓瘤、镰状细胞性贫血、肾脏病、器官移植患者，使用药物（如肼屈嗪、普鲁卡因胺等）等。健康人中0.1%DAT 阳性，住院患者DAT 阳性率为1%～15%，这些人大多无溶血表现。DAT 阳性的意义在于：如果患者存在溶血，则很可能是免疫机制介导的。
导致DAT 阳性的原因包括：①红细胞自身抗体；②近期输血，受血者血浆中的同种抗体与输入红细胞上的相应抗原反应；③输入的供者血浆或血浆制品中含同种抗体，使受者红细胞致敏；④母亲血液中同种抗体通过胎盘进入胎儿体内并使胎儿红细胞致敏；⑤针对红细胞膜上结合的药物（如青霉素）的抗体；⑥非特异性蛋白吸附，包括免疫球蛋白（如高丙种球蛋白血症或大剂量使用静脉丙种球蛋白）、某些药物如头孢菌素引起红细胞膜改变；⑦由同种抗体、自身抗体、药物或细菌感染等激活补体并结合于红细胞上；⑧器官移植患者过客淋巴细胞（passenger lymphocyte）产生的抗体。
