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关于分离纯化蛋白质的电泳操作的介绍

2022.3.09

  *SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳,常用于蛋白质分子量的测定。

  *等电聚焦电泳,通过蛋白质等电点的差异而分离蛋白质的电泳方法。

  *双向凝胶电泳是蛋白质组学研究的重要技术。

  * 层析(chromatography)或色谱法:待分离蛋白质溶液(流动相)经过一个固态物质(固定相)时,根据待分离蛋白质的颗粒大小、电荷多少及亲和力等,使蛋白质组分在两相中反复分配,并以不同速度流经固定相而分离蛋白质。凝胶过滤(分子筛,gel filtration;排阻色谱):利用各蛋白质分子大小不同分离。

  离子交换:蛋白质的电荷量及性质不同。

  阳离子交换剂:CM-纤维素

  阴离子交换剂:DEAE-纤维素

  亲和层析:抗原-抗体,配体-受体,金属离子,生物素等

  高效液相(HPLC):反相HPLC,离子HPLC,凝胶过滤HPLC

  * 超速离心法(ultracentrifugation):根据蛋白质的分子量与形状分离。

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