免疫组化法检测细胞内表达的各种蛋白的标志物介绍
①S100蛋白:S100蛋白是一组低分子量的钙结合蛋白，相对分子量为10x103~12x103，其氨基酸序列在脊椎动物中高度保守，与钙调蛋白具有高度同源性。目前，共发现有20种结构与功能相似、存在于不同部位，可以调节细胞内和细胞外Ca2+的S100蛋白，包括S100A1~S100A13,S100B,S100P,钙粒蛋白C,钙结合蛋白3等。其中,S100B主要分布于中枢神经系统和外周神经系统的神经胶质细胞和Schwann细胞以及某些神经元细胞、黑色素细胞、软骨细胞和脂肪细胞中,而S100A4主要分布于成纤维细胞,S100A7则主要分布于上皮细胞。
②神经节苷酯GD3:神经节苷脂(gangliosides,GLS)是一类含唾液酸的鞘糖脂,因其最早被发现于神经节细胞而得名。根据其所含的唾液酸残基数目的不同,可分成GM、GDGT和GQ等。每种神经节苷酯还可根据薄板层析迁移率Rf值的大小再分几个亚类，如GD1、GD2、GD3等。GM3被称为黑色素瘤的跨种抗原,但GD3较GM3更具特异性，两者在正常MC中的比值GM3:GD3为18:1,在黑色素瘤中GM3:GD3为1:15。
③黑素小体特异抗原-1和黑素小体特异抗原-5:研究表明，黑素小体特异抗原(humanmelanosomespecificantigens,HM-SA)-1和HMSA-5在黑色素瘤中染色阳性率分别为60%和69%。HMSA-1主要在无色素的肿瘤和唾液腺肿瘤.上皮中表达,它主要用于标记有恶变的MC,培养的正常皮肤MC染色阴性。HMSA-5识别的是一种69~73kDa的糖蛋白，出现在人类的一切形式的MC,可能会在以后的成熟过程中丢失。因此,一般用HMSA-5标记正常人MC,体外培养的MC染色阳性。DHMB45(抗Gp100):Gp100是一种100kDa的糖蛋白，NKI/beteb,HMB-45,HMB-50和ME20均识别这种抗原。其中，HMB-45单抗鉴别不成熟黑素小体，表达于MC肿瘤和神经嵴肿瘤，正常乳腺上皮和一些乳腺癌、汗腺和-一些汗腺肿瘤等也有表达,在诊断恶性黑色素肿瘤方面比S100或NKI/C3更具特异性。因此,HMB-45标记有恶变的MC,培养的正常MC染色呈阴性。
⑤酪氨酸酶(TYR)及酪氨酸酶相关蛋白1,2(TRP1和TRP2):这些均是MC内黑色素生成的相关酶，也被用来鉴别MC。
⑥Melan-A(-种MC分化标志物):属于Melan-A基因的表达产物,称为MART-1(T细胞识别的黑色素瘤抗原),是从黑色素瘤细胞系中克隆而来。它的亚细胞位点还不确定,但被认为是和黑色素小体及内质网相联系，这种基因常在皮肤、视网膜和恶性黑色素瘤的MC中表达,除MC外，能表达该基因的细胞有血管肌肉脂肪瘤。培育出的两种单抗是A103和M2-7C10。两种抗体都适合在石蜡包埋甲醛周定的组织中应用,A103在组织材料巾的应用研究最为广泛,M2-7C10主要用于细胞学标本的研究。
⑦CK16:有学者研究了细胞角蛋白在MC.上的表达情况，发现所有的MC均表达CK16,而不表达CK1、CK5、CK8、CK10、CK14,甚至经常与CK16起在角朊细胞上共表达的CK6也未见表达。
⑧其他:很多MC特异性抗原或者表面受体在被不断的研究发现，如Sox10。Sox10是一种神经管(嵴)转录因子,在Schwann细胞和MC的分化、成熟和功能维持方面，发挥着重要作用。Sox10抗体可以应用于许多种神经嵴衍生的肿瘤、间叶和上皮性肿瘤以及正常组织。97%黑色素瘤和49%恶性外周神经鞘膜瘤表达Sox10,并定位于细胞核,因此，被认为是一种雪旺细胞和MC的广谱标记物。另外，还有Toll样受体2、4、7、9和CD40等。
