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关于LacZ基因的时空表达介绍

2022.10.30

  转基因小鼠实验系统已被广泛用于单一基因功能的研究,如组织特异表达和发育程序的调控。产生转基因小鼠最普遍的方法是将DNA通过显微注射注入受精卵的原核中。在研究小鼠胚胎发育过程中外源基因的时空表达方面,将融合基因注射进入小鼠受精卵原核中更是一条行之有效的途径。

  通过上述方法,将SV40早期启动子和LacZ基因形成的融合基因注入原核来研究小鼠胚胎着床前期发育过程中外源基因的表达。发现注入的外源基因从4细胞到胚泡这段时期均有表达;在桑葚胚时期基因表达的胚胎数占所检测胚胎数的百分比最高(38%);另外,表达依靠SV40启动子的存在。

  LacZ基因还可做为外源启动子在小鼠早期胚胎发育中是否有功能的指示基因,评估来自不同真核启动子的基因表达情况。Stevens等人构建的融合基因含有可诱导的小鼠MT-1 promoter和LacZ基因,用锌诱导处理后,表明MT-1 promoter从小鼠胚胎发育开始就有功能,它在早至1细胞时期即能通过诱导使其后的LacZ基因表达。Bonnerot等用逆转录病毒感染多能干细胞,通过beta-gal酶活性检测或通过免疫电镜技术,证明了所构建的融合基因nls-beta-Can所表达的蛋白分布在细胞核周围。用原核注射方法所得结果表明,与LacZ基因相融合的几种启动子(SV40e arly,R SV;be ta-actin)在2细胞胚胎中有功能而Mo-MLV启动子则没有功能。

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