如何选择流式细胞仪(2)
⑼、检测细胞内因子（TH1/TH2细胞检测）
未活化的淋巴细胞所分泌的细胞因子极少，用流式细胞仪很难检测出来。因此，在检测前需刺激活化。活化所用的刺激素为PMA佛波酯+Ionomycin。淋巴细胞在刺激素的作用下活化，分泌细胞因子到细胞外。因流式细胞仪只能对细胞表面或内部的抗原进行检测，如细胞因子分泌到细胞外则检测不到。因此必须阻止细胞因子的分泌。抑制细胞因子分泌的试剂为Brefedlin A或Monensin。Th1/Th2细胞首先是CD4+T细胞。因此存在着用CD4来设定细胞群的问题。我们知道CD4不但在T细胞上表达，还在所有的单核细胞上表达。因此单独用CD4设门无法将CD4+T细胞区分开来。那么我们用CD3和CD4双参数设门是否可以呢？回答是否定的。因为在佛波酯的刺激作用下CD4 抗原的表达会迅速下调，甚至完全丧失。所以不适合于设门。用CD3和CD8设门，因CD8不受佛波脂的影响且绝大多数D3+CD8的细胞都是CD3+CD4+细胞，因此可用CD3+CD8-细胞群来确定CD4+T细胞群。FITC标记CD8，PE标记IL-4和，PE-CY5标记IFN-r，APC或PE-CY7标记CD3。
流式细胞仪要求：488nm或633nm（仅限APC染料）光源，525nm、575nm、675nm，767nm滤光片
⑽、细胞增殖状态检测
核增殖抗PCNA、Ki67、BrdUrd用于衡量细胞增殖分裂状况，在评估肿瘤预后有重要意义。为些标志物的检测一般同细胞表面标志物同时检测。FITC标记PCNA或Ki67或BrdUrd，PE或（并）PE-CY5标记细胞表面标志物。
流式细胞仪要求：488nm或633nm光源，525nm、575nm、675nm滤光片
⑾、染色体分析
流式细胞仪染色分析运用两种特异性染料：Hoechest33258与核苷酸AT结合；Chromomycin A3与GC相结合。从而在双参数坐标上根据染色体ATCG含量的不同识别各种染色体。平时进行的染色体分析耗时且需要操作者极具经验，而用流式细胞仪时可快速地识别出异常染色体，如加配分选系统可将这些异常染色体分选出来作进一步分析。本文来自检验地带网
流式细胞仪要求：360nm或488nm光源，450nm、580nm滤光片
⑿、BrdUrd标记追踪细胞分化 copyright labdd.com
通过细胞分化时涉入溴化尿嘧啶，再使用抗BrdUrd抗体及PI核酸染料可精确识别它们。在流式细胞仪上可清楚地识别出处于G1、S、G2、M期的细胞，在肿瘤研究中有着重要作用。
流式细胞仪要求：488nm光源，525nm、575nm滤光片
⒀、淋巴细胞亚群分析
外周血CD3、CD4、CD8、CD19、NK等各类淋巴细胞亚群定量分析。
流式细胞仪要求：488nm光源，525nm、575nm滤光片，液量绝对计数系统www.labdd.com
⒁、白血病免疫分型
CD45设门三色白血病免疫分型。
流式细胞仪要求：488nm光源，525nm、575nm、675nm滤光片。最少三色荧光，参数越多检测越为灵敏。
⒂、血小板分析
血小板活化实验、血小板功能分析。血小板识别抗体及相应活化指标。
流式细胞仪要求：488nm光源，525nm、575nm、675nm滤光片，液量绝对计数系统
⒃、白血病、淋巴瘤微小残留病灶检测
根据初诊免疫分型结果，多参数联合设门检测是否有残留白血病细胞，监测白血病的复发。
T系白血病微小残留病灶检测 本文来自检验地带网
流式细胞仪要求：488nm光源，525nm、575nm、675nm滤光片，液量绝对计数系统
B系白血病微小残留病灶检测，液量绝对计数系统 copyright labdd.com
流式细胞仪要求：488nm光源，525nm、575nm、675nm滤光片。最少三色荧光，参数越多检测越为灵敏。
髓系白血病微小残留病灶检测，液量绝对计数系统
流式细胞仪要求：488nm光源，525nm、575nm、675nm滤光片。最少三色荧光，参数越多检测越为灵敏。
⒄、细胞凋亡分析 检验地带网
DNA凋亡峰检测、ANNEXIN-V/PI双染法凋亡检测。
流式细胞仪要求：488nm光源，525nm、575nm滤光片
⒅、肿瘤耐药分析
P-gp、LRP、MRP、BCRP各类耐药蛋白表达及功能检测。
流式细胞仪要求：488nm光源，525nm、575nm、675nm滤光片
⒆、强直性脊柱炎诊断
检测淋巴细胞B27表达强度及百分比，诊断强直性脊柱炎。
流式细胞仪要求：488nm光源，525nm、575nm、675nm滤光片
⒇、PNH诊断
外周血或骨髓检测淋巴细胞、粒细胞、红细胞或单核细胞CD55、CD59表达强度或百分比，确诊夜间阵发性血红蛋白尿。
流式细胞仪要求：488nm光源，525nm、575nm、675nm滤光片。
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